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麻烦有经验的老师帮忙看看以下的标记搭配是否合理:
T淋巴细胞检测 取肿瘤组织悬液,用荧光标记抗体对单细胞进行染色。用 anti-CD3-PE、anti-CD4-FITC、 anti-CD8a-APC抗体染色,进行流式细胞仪检测,分析肿瘤组织效应T细胞。取脾脏组织悬液,用荧光标记抗体对单细胞进行染色。用anti-CD3-PE、anti-CD8-PerCP-Cy5.5、anti-CD44-FITC、anti-CD62L-APC抗体染色,进行流式细胞仪检测,分析记忆T细胞。 取肿瘤组织悬液,用荧光标记抗体对单细胞进行染色。用anti-CD3-PerCP-Cy5.5、anti-CD4-FITC、 anti-CD25-APC、 anti-FoxP3 -PE染色后分析Tregs (CD3+CD4+CD25+Foxp3+)淋巴细胞。用anti-CD3-PerCP-Cy5.5、anti-CD4-FITC、anti-CD8-PE、 anti-IFN-γ-APC抗体染色后分析 CTLs(CD3+CD4-CD8+)和CD4+T细胞(CD3+CD4+ CD8-),进行流式细胞仪检测。
成熟DCs细胞检测 取淋巴组织或脾脏组织悬液100 μL,加入1.5mL离心管中,而后分别加入1 μL FITC标记的CD80抗体、1 μL APC标记的CD86抗体以及1μL PE标记的CD11c 抗体,震荡混匀后,避光孵育,室温下孵育30 min,进行流式细胞仪检测。
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