看看我这个PBMC哪群是淋巴细胞啊？

kinsuo

PBMC用Ficoll-plus收集（GE的），有少量RBC，用裂红液处理。由于一次处理较多样品，收的PBMC悬浮于HBSS中置于冰上，大约4h才去染色（PBMC放在培养基中更好吧）。

niwanmao

FSC的电压还可以再调大一点。
我觉得2的可能性最大。但比例怎么这么低呢？

kinsuo

niwanmao 发表于 2011-12-28 11:54

                               
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FSC的电压还可以再调大一点。
我觉得2的可能性最大。但比例怎么这么低呢？ ...

2应该正常形态，可能是放冰上太久了，细胞形态发生变化，1也应该是淋巴细胞吧，因为分离时分层还是很明显的。还有就是用FSC-H和FSC-A哪个准确了？

niwanmao

kinsuo 发表于 2011-12-28 16:43

                               
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2应该正常形态，可能是放冰上太久了，细胞形态发生变化，1也应该是淋巴细胞吧，因为分离时分层还是很明显 ...

分层清楚也不能代表肯定是淋巴吧，ficoll提取pbmc，单核细胞也属于单个核细胞，也会同时提取出来的。建议最好用CD3之类的抗体鉴定一下。

chujindong

看的莫名其妙的。PBMC中单核细胞的量应该是不多的，3和5没有细胞群，不用专门圈一群。FSC要加大20左右。单独做一份细胞看看。

niwanmao

chujindong 发表于 2011-12-30 18:32

                               
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看的莫名其妙的。PBMC中单核细胞的量应该是不多的，3和5没有细胞群，不用专门圈一群。FSC要加大20左右。单 ...

哦，如此说应该1、2都属于淋巴细胞吧，估计只是这个图显示造成我们误解了。