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[标本处理] 干细胞解冻复苏加入7-AAD的时机

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发表于 2013-1-31 22:53:37 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
各位老师好!!
       我做干细胞标记好CD34&CD45,临上机前加入7-AAD孵育10min后立即上机检测,结果测出的细胞活性才只有50%左右,活的CD34+ 更低。我有疑问:
1.是不是我加入的时机不对?请问各位老师如果有做7-AAD的,是什么时候加入的呢?
2.加入7-AAD后还需不需要PBS洗涤呢?我两种都做了,觉得洗涤后值会高一点点。
最后,祝各老师新年快乐!!

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发表于 2013-2-1 09:50:00 | 显示全部楼层
请参见BD stem cell kit的幻灯(第18页),可见是CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的。我们平时做干细胞检测由于历史原因,一直没加7-AAD,所以只能给你这个参考。我觉得这个方法还是合理的,虽然这是一个免洗方案,但一起加进去标记后,后面的裂解步骤其实就类似于洗涤了。
这个幻灯很详细的从干细胞检测方案的演化、试剂盒的介绍、标准流程和方法的介绍,虽然其中不乏一些商业性的内容,但这些标准流程、标准设门对我们还是有参考意义的。

干细胞绝对计数分析设门流程

干细胞绝对计数分析设门流程

干细胞绝对计数分析设门流程

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