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楼主: ^_^_恕_^_^

[结构和原理] 关于流式图中显示的信号的问题

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发表于 2014-4-28 19:27:39 | 显示全部楼层
^_^_恕_^_^ 发表于 2014-4-28 17:48
多谢!我实质上关心的是图中显示的信号与原始信号是线性关系还是对数关系(谁是谁的对数),谢谢!{:1_1: ...

我不知道您所说的原始信号是什么意思,电脑上的原始数据还是软件里面输出的荧光强度值,个人认为作为一般用户不需要知道电脑上的原始数据是怎么储存的,只需要通过软件看图形和调出荧光强度的统计值即可。而这两者是一致的。
如果想知道数据文件里面原始数据和软件显示的关系,那就要看什么仪器,BD的原始数据、软件显示和统计荧光强度三者的值一致,其他的不好说。但是图和软件统计出来的荧光强度应该是一致的。

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发表于 2014-4-28 19:30:37 | 显示全部楼层
^_^_恕_^_^ 发表于 2014-4-28 17:47
我的想法是用过量的蛋白标记细胞后,其荧光值规定为100%,其余相应的调整,看其他浓度下的蛋白标记比例。 ...

你想太多了,其实和图形显示没关系,直接从软件上调出mean、media这类值直接算即可。
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 楼主| 发表于 2014-4-28 21:19:12 | 显示全部楼层
haven_t 发表于 2014-4-28 19:27
我不知道您所说的原始信号是什么意思,电脑上的原始数据还是软件里面输出的荧光强度值,个人认为作为一般 ...

你好!我说的原始信号是指的细胞表面结合的探针所发出的实际荧光(不是被仪器放大接收后所显示的)。我就想问BD calibur仪器检测显示在图中的如FL1-H这类荧光与实际荧光的比例是线性关系还是什么关系?谢谢!
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发表于 2014-4-28 21:42:08 | 显示全部楼层
^_^_恕_^_^ 发表于 2014-4-28 21:19
你好!我说的原始信号是指的细胞表面结合的探针所发出的实际荧光(不是被仪器放大接收后所显示的)。我就 ...

@^_^_恕_^_^   我前面说了,要测荧光绝对值,只能通过已知荧光强度的荧光参照微球(这种微球市场上有卖的),而通过了解仪器原理也无法得到你这些荧光的绝对值,因为仪器的作用就是把光信号转换成电信号。
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 楼主| 发表于 2014-4-28 23:06:40 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2014-4-28 21:42
@^_^_恕_^_^   我前面说了,要测荧光绝对值,只能通过已知荧光强度的荧光参照微球(这种微球市场上有卖 ...

好的,看来也只能这么办了,谢啦!
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发表于 2014-4-29 08:43:13 | 显示全部楼层
^_^_恕_^_^ 发表于 2014-4-28 17:48
多谢!我实质上关心的是图中显示的信号与原始信号是线性关系还是对数关系(谁是谁的对数),谢谢!{:1_1: ...

你说的原始信号是指流明吧,不可能得到的,你只考虑到放大器,没考虑到PMT的电压,PMT除了光电转换外还有一个放大的功能,1个光子转换成多大电信号可以通过PMT电压调整,那个才是关键。
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 楼主| 发表于 2014-4-29 13:50:39 | 显示全部楼层
haven_t 发表于 2014-4-29 08:43
你说的原始信号是指流明吧,不可能得到的,你只考虑到放大器,没考虑到PMT的电压,PMT除了光电转换外还有 ...

好吧,感觉很复杂,估计是没办法得到了,只能用荧光参照微球的方法了。多谢啦!
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