你可知道嗜酸粒细胞从早幼到成熟的分化规律吗？

niwanmao

2024年04月26日，Trindade CJ等人在Cytometry B杂志上发表了《Flow cytometric immunophenotypic differentiation patterns of bone marrow eosinophilopoiesis》一文，详细介绍了嗜酸粒细胞的免疫表型分化规律。下面我们学习一下这篇文章。

为什么要研究嗜酸粒细胞分化？
因为嗜酸性粒细胞在包括髓系肿瘤在内的各种疾病中发挥着重要作用，因此需要更好地了解骨髓中嗜酸性粒细胞成熟过程中的免疫表型变化。

候选抗体的选择
作者选择了 EMR-1、Siglec-8、CCR3、CD9、CD11a、CD11b、CD11c、CD13、CD16、CD29、CD34、CD38、CD45、CD44、CD49d、CD49f、CD54、CD62L、CD69、CD117、CD125（IL-5Rα）和 HLA-DR 等标记物，因为这些标记物可在嗜酸性粒细胞或其他成熟的髓样前体上表达过。作者的目的是找出一种标记物组合，以划分骨髓中嗜酸性粒细胞成熟的不同阶段。

5管10色方案




最终抗体组合
作者发现Siglec-8、CD9、CD11b、CCR3、CD49d和 CD49f 抗体的组合清楚地描绘了嗜酸性粒细胞成熟模式。他们确定了三个阶段：
- 早期阶段（嗜酸性早幼粒细胞/中幼粒细胞）：Siglec-8 dim/CD11b dim to moderate/CD9 dim/CCR3 dim/CD49d bright/CD49f dim
- 中期阶段（嗜酸性中幼粒细胞/晚幼粒细胞）：Siglec-8 moderate/CD11b moderate to bright/CD9 moderate/CCR3 moderate/CD49d moderate/CD49f moderate
- 成熟期（杆状/分叶核嗜酸性粒细胞）：Siglec-8 bright/CD11b bright/CD9 bright/CCR3 bright/CD49d dim/CD49f bright




关键结果
1、新型流式抗体组合：
作者设计了一种新型多色流式细胞术抗体组，使用嗜酸性粒细胞标志物如EMR-1、Siglec-8、CCR-3、CD125联合CD9、CD49d、CD49f、CD13、CD11a、CD11b、CD11c、CD44、CD62L、CD162、CD29、CD45和CD69。该面板使他们能够根据Siglec-8、CD9、CD11b、CCR3、CD49d和 CD49f 的差异表达模式描绘嗜酸性粒细胞成熟阶段。

2、HES和SM患者中总体成熟模式的相似性：
使用该抗体组合，作者观察到与正常骨髓嗜酸性粒细胞相比，高嗜酸性粒细胞综合征 (HES) 和系统性肥大细胞增多症 (SM) 患者嗜酸性粒细胞成熟的免疫表型模式总体相似。根据关键标志物的表达，可在这些患者中确定成熟阶段（早期、中期、成熟）。

3、HES和SM患者中表面标志物的表达改变：
虽然总体模式相似，但作者发现，与健康人相比，HES和 SM 患者成熟嗜酸性粒细胞上几种表面标志物的表达水平存在显著差异：

a）表达降低：
- HES 和 SM 患者成熟过程中 Siglec-8 表达显著降低
- HES 和 SM 中成熟嗜酸性粒细胞的 CD49f 和 CD13 表达减少

b）表达增加：
- HES 和 SM 患者成熟嗜酸性粒细胞上 CD69 表达显著增加
- 成熟嗜酸性粒细胞上的 CD9 表达增加，尤其是 SM 患者
- HES 患者成熟嗜酸性粒细胞上 CD44 表达增加



4、对其他疾病的适用性：
作者认为，使用该抗体组合，能够分析以嗜酸性粒细胞增多或嗜酸性粒细胞生成失调为特征的其他血液学疾病中骨髓嗜酸性粒细胞生成的免疫表型模式的变化。

参考文献：Trindade CJ, Sun X, Maric D, et al. Flow cytometric immunophenotypic differentiation patterns of bone marrow eosinophilopoiesis. Cytometry B Clin Cytom. Published online April 26, 2024. doi:10.1002/cyto.b.22174IF: 3.4 Q2