淋巴细胞分离之后成分发生很大变化

特勒兮兮

问下各位同仁，谁知道这是为什么吗？问题1：分离之后单核占的比例增大了很多；问题2：分离之后的NK升高了很多，但是CD3减少了40%左右。仅仅用淋巴细胞分离液分离了一下PBMC.

niwanmao

是否吸白膜层的操作原因？
Ficoll分离时，操作会造成很大的差异。

特勒兮兮

niwanmao 发表于 2019-12-9 15:54
是否吸白膜层的操作原因？
Ficoll分离时，操作会造成很大的差异。

1.单核细胞比例增大问题，我们离心是800g，25min，而且细胞密度很大，所以有可能是提膜的时候，单核细胞损失少，淋巴细胞损失大原因造成的吗；2.NK比例增大的问题。这个真不大理解，同样都是淋巴细胞，为啥NK损失少，T细胞损失多。

tiger

特勒兮兮 发表于 2019-12-10 08:42
1.单核细胞比例增大问题，我们离心是800g，25min，而且细胞密度很大，所以有可能是提膜的时候，单核细胞 ...

分离后点图可看到四群细胞，你圈的这群只有T和NK，没有B，圈其他三群细胞试试。

特勒兮兮

tiger 发表于 2019-12-10 11:49
分离后点图可看到四群细胞，你圈的这群只有T和NK，没有B，圈其他三群细胞试试。 ...

左边俩群是死细胞，所以没有圈进去，因为是病人所以没有CD19是正常的

niwanmao

特勒兮兮 发表于 2019-12-10 08:42
1.单核细胞比例增大问题，我们离心是800g，25min，而且细胞密度很大，所以有可能是提膜的时候，单核细胞 ...

单核细胞可用吸取的时候位置不同解释。
淋巴细胞内比例不同，应该用圈门位置来解释，你可以尝试CD3＋反设门。