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[结构和原理] 流式细胞仪是如何分辨荧光信号是由哪个激光器激发的?

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发表于 2019-12-9 15:44:19 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
本帖最后由 zhkduck 于 2019-12-9 15:49 编辑

以BD的C6流式细胞仪为例
FL3的滤光片是670LP
FL4的滤光片是675/25
PerCP是488激光激发的红光,APC是640激光激发的红光
所以仪器应该是能区分荧光信号是由哪个激光器激发的对不对,要不然PerCP的信号FL4的滤光片也可以接收到,荧光泄漏就很夸张了对不对?

PS:PerCP和APC应该不用调补偿的吧?

488激光器

488激光器

640激光器

640激光器
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发表于 2019-12-9 15:53:23 | 显示全部楼层
这就是光路设计的事情了,光路设计工程师会把这两路分开的。
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发表于 2019-12-10 00:00:14 | 显示全部楼层
之前论坛里有人问过同样的问题。原理是每根激光的检测点后边有一个pinhole(针孔),只有对应激光器激发产生的荧光信号才能通过。这样就从硬件层面将不同激光激发产生的荧光信号隔离,每根激光对应一套PMT,所以才不会相互干扰。

pinhole

pinhole
pinhole_488.jpg

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