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[结构和原理] 间充质干细胞表型检测试验方案设计,如何测定抗体滴定

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发表于 2019-12-14 01:05:22 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
大家好,我需要做间充质干细胞的表面标志物的(CD90-BV786,CD105-PE,CD44-PE-CF594,CD29-APC,CD73-BV421,CD14-APC ALEXAFLOR 750,CD34-PE-CY7,CD31-FITC,CD45-ALEXA FLOR 700,HLA-DR-PERCP CY5.5)表达率,目前的配色方案是每一个抗体对应一个maker,总共有10maker,想的是先做抗体滴定,问题是我应该怎么样来做这个抗体滴定实验?有老师推荐用血细胞做抗体滴定,但是我又怎么将我的细胞和血细胞滴定的抗体联系起来呢?是不是还要再做一些实验来验证呢?还有就是抗体滴定做完了,上样本我是不是一定要做单阳管,FMO,还需要再做同型对照吗?求各路大神指导下。流式新人。

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发表于 2019-12-14 16:50:56 | 显示全部楼层
即使用白细胞,也没法覆盖完整。
我的建议是,对于这些多色方案,先按照推荐量做。做好之后,看结果分群,挑选分群差的标记,进行滴定。滴定的原则就是要有阳性和阴性细胞群,并且分得开。所以可以选择某些白细胞作为阳性和阴性群,滴定结果是通用的。
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