流式中文网

标题: 半小时视频，帮你找出做好磷酸化流式的几个关键点 [打印本页]

作者: niwanmao 时间: 2018-9-28 10:28
标题: 半小时视频，帮你找出做好磷酸化流式的几个关键点
这是油管上的视频，主讲者是CellSignal技术支持，短短30分钟，言简意赅总结了磷酸化蛋白流式检测中的一些关键要点：
1、固定和破膜的方法选择：
[attach]15953[/attach][attach]15954[/attach]
2、抗体结合位点，可影响检测结果：
[attach]15955[/attach]

3、检测的时间点很重要：
[attach]15956[/attach]

4、三种染色方式的对比，优选中间这种：
[attach]15957[/attach]

5、有时候，当你发现表面标记不见了，两个解决方法，一是换另一克隆号的抗体，二是换固定和破膜剂：
[attach]15958[/attach]

如此有价值的内容，这视频得好好看看，视频如下（请在电脑端观看）：

作者: Wlmedicine 时间: 2019-1-11 15:38
incubation buffer , wash buffer 怎样影响流式结果？

作者: hebiorange 时间: 2022-8-3 09:52
倪老师，想问一下，因为要看Treg 的 pSTAT5 signal, 要破两次膜，那我这个 live/dead 什么时候染合适？看paper 都是在 stimulate 前，把 live/dead 染上，再进行体外刺激，这样是有什么好处么？

作者: dongfangyao 时间: 2023-4-29 15:21
倪老师，其中有一点，视频中anti-CD3/28刺激后，流式还能用CD3抗体标记上
这一点，我在实际过程中做不到，用anti-CD3/28的抗体刺激PBMC后，CD3流式检测抗体就标记不上了

作者: niwanmao 时间: 2023-4-30 10:03

dongfangyao 发表于 2023-4-29 15:21
倪老师，其中有一点，视频中anti-CD3/28刺激后，流式还能用CD3抗体标记上
这一点，我在实际过程中做不到， ...

一般用plate-binding CD3/CD28，或者CD3/CD28 beads刺激。

可溶性直接刺激，是会导致结合不上，你在另一个帖子中提问，我回答了。

欢迎光临流式中文网 (https://www.flowcyto.cn/bbs/)