找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 1082|回复: 2

山羊血清封闭对间标法结果的影响,结果分享

  [复制链接]
发表于 2016-12-30 15:18:26 | 显示全部楼层 |阅读模式

亲爱的FLOWER,加入流式中文网,一起讨论,一起学习,享受更多福利吧!

您需要 登录 才可以下载或查看,没有账号?加入流式中文网

×
本帖最后由 Justin-威 于 2016-12-30 15:24 编辑

实验材料


1;一抗:兔多抗CD3E(浓度0.3mg/ml)

2;二抗:FITC-羊抗兔IgG(浓度2mg/ml)

3; 浓缩型山羊血清

4;细胞用PBS缓冲液

5;样本:Jurkat细胞(2x107/ml

实验分组
图片6.png



间标实验步骤:

1;取71.5ml EP管,每管加200μl 样本细胞,分别标记为B1B2B3B4B5B6B7

2;根据实验分组分别加入相应量的浓缩型山羊血清,37度孵育10分钟,不洗。

3;根据实验分组分别加入相应量的一抗,37度孵育30分钟。离心清洗3次,转速1500rmp/min,时间5分钟。

4;根据实验分组分别加入相应量的浓缩型山羊血清,37度孵育10分钟,不洗。

5;根据实验分组分别加入相应量的二抗,37度避光孵育30分钟。离心清洗3次,转速1500rmp/min,时间为每次5分钟。

4;上机分析结果。(FITC通道电压默认为124,手动调节为30,补偿无需调节。用BLANK组画散点图,圈门,再画叠加直方图,观察趋势)


实验结果:
图片1.png 图片4.png
图片2.png
图片3.png

以上是阴性对照的几个图,从直方图来看,封闭对抑制非特异染色作用明显







组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2016-12-30 15:50:42 | 显示全部楼层

图片7.png 图片8.png
封闭效果:封闭>不封闭,封闭两次>封闭一次,一抗后封闭>一抗前封闭
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2016-12-30 15:38:44 | 显示全部楼层

图片1.png 图片2.png 图片3.png 图片4.png
以上四个图也可以看出封闭确实有效果,而且在一抗后封闭比在一抗前封闭效果要好
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2|浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2024-4-29 04:32

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2024 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表