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OMIP-056:人常规T细胞的功能检测(记忆状态、胞内因子)等

发布者: niwanmao | 发布时间: 2019-6-30 17:42| 查看数: 1269| 评论数: 4|帖子模式

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尽管有大量的研究和临床试验,但是目前仍尚未开发出针对复杂病原体如HIV、结核病(TB)和疟疾的高效疫苗。 阻碍这种发展的原因之一,就是缺乏对人体应对病原体免疫防护机制的深入了解。多色流式细胞仪,特别是多达28色流式,可以识别风险或保护的免疫相关性。
在One Dintwe等人所在的HIV疫苗试验网络(HVTN)实验中心内,一般用细胞内细胞因子染色(ICS)量化和分析T细胞对候选疫苗的反应。他们小组设计了一管26色方案《OMIP-056: Evaluation of Human Conventional T Cells, Donor-Unrestricted T Cells, and NK Cells Including Memory Phenotype by Intracellular Cytokine Staining》,用于明确结核病疫苗在临床试验中的免疫效应能力。


方案
方案主要包括了:
1)谱系和死活染料:CD3、CD4、CD8、CD14、UViD;
2)功能性标志物:IFN-γ、IL-2、TNF-α、CD40L、IL-17、颗粒酶A、Th2细胞因子(IL-4/IL-13组合,同一通道);
3)记忆标记:CCR7、CD45RA;
4)其他谱系标记:γδTCR、CD56、CD16;
5)MAIT细胞:CD161、CD26、Vα7.2;
6)活化:HLA-DR;
7)用于辅助T细胞分类的趋化因子受体:CXCR3、CCR6;
8)其它功能性标记:IL-22、perforin
9)分化标记:KLRG- 1、PD-1
20190630_172120.png

设门方法
设门步骤及其作用,基本上写在图上了,相信应该比较清晰明了。
一共7组图:
20190630_164233.png 20190630_164815.png 20190630_165306.png 20190630_165712.png 20190630_170459.png 20190630_170608.png 20190630_170753.png

有了这些方案资料和设门图,相信你对于常规T细胞的功能检测,以及γδT、MAIT、NK、单核亚群等检测会有相当程度的了解吧。

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参与人数 1流星 +1 收起 理由
我想成大牛 + 1 想想以前跟老师学多色的时候,接触的方案和.

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最新评论

btx362237729 发表于 2019-7-2 16:48:34
感谢分享 这个做起来还是有难度哦
蒙牛一头牛 发表于 2019-7-3 15:53:25
学习了,谢谢倪老师
wenyi.zheng 发表于 2019-7-3 18:04:37
请教倪老师如何获得OMIP的操作细节?看见网站上说OMIP分为两部分,包括online component includes significant amount of technical details, such as panel development strategy, cross-references to related panels, exact staining protocol, instrument configuration and reagent information.
希望得知具体操作步骤,例如破膜液的选择。
望答复,谢谢!
niwanmao 发表于 2019-7-4 14:40:22
wenyi.zheng 发表于 2019-7-3 18:04
请教倪老师如何获得OMIP的操作细节?看见网站上说OMIP分为两部分,包括online component includes signific ...

现在编译了这么多,貌似没看到。
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