双抗是否会影响细胞因子的流式检测？

dimmy1991

我最近在做IFN-gamma和TNF-a的流式检测，取得小鼠的淋巴结，因为之前每次都会有个别孔发生污染，因此，我再最近一次的实验中，取材过程中pbs加入1%的双抗，在培养基（RPMI1640，无血清）中也加入了1%双抗，未发生污染，用PMA进行8个小时的刺激（步骤同之前的实验），但是在检测结果时，发现比之前的结果要低一些，请问，是不是因为双抗的原因导致的呢，有没有大神也做过同样的实验呢？

niwanmao

抗生素不会影响，找一下其它原因吧。

灬MIKI灬Love

抗生素不会影响的，建议配置培养基用0.22ul滤膜（绿色“奶嘴”）无菌20ml注射器顾虑，封存。另外小鼠主要Th1细胞因子，感觉可能是T细胞，T细胞比较活跃，不建议8hr，人的PBMC中T一般BD cocktail（三合一刺激剂）推荐刺激4-6hr，个人经验可以PMA5ng/ml,Iono 1ug/ml.,BFA(1×）作用2.5hr左右，人的T可有TNF60-80%，IFNr50-70%，希望可以帮到你