如何从形态上判断淋巴细胞活化

冰澈澄溪

怎么判断刺激是否成功呢？我在做IFN-γ的染色，用小鼠肺跟脾脏细胞，做了很多次测出来含量特别低。是不是PMA失效了？

niwanmao

冰澈澄溪 发表于 2013-9-18 10:24
怎么判断刺激是否成功呢？我在做IFN-γ的染色，用小鼠肺跟脾脏细胞，做了很多次测出来含量特别低。是不是PM ...

判断的标准应该就是表达率和分群。如果跟现有的参考文献比低很多，可能就提示刺激效果差，但是是不是刺激剂的问题，还是得一步步排除。

冰澈澄溪

3Q~您有刺激后的细胞形态图片吗？

niwanmao

冰澈澄溪 发表于 2013-9-18 10:47

                               
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3Q~您有刺激后的细胞形态图片吗？

你刺激后不是做流式吗？

冰澈澄溪

是做流式但是没染出色来。不是可以通过细胞形态看是不是刺激成功吗？

niwanmao

冰澈澄溪 发表于 2013-9-22 10:00

                               
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是做流式但是没染出色来。不是可以通过细胞形态看是不是刺激成功吗？

形态不太懂，@pushiming77  @samly0  是否知道怎么看细胞刺激后形态上的改变，能够从形态上看出是否刺激成功？有点怀疑。

samly0

如果是淋巴细胞刺激活化增殖后，镜下是可以看的出刺激的形态的，未刺激前都是等大等圆形态一致的淋巴细胞，刺激后细胞会大小不一，增殖的细胞比不增殖的细胞体积大，折光性很好，挺明显的，换不同倍镜仔细观察下细胞形态吧，形态观察其实挺重要的

samly0

这是很早以前我拍的细胞图，因为显微镜没有外接的图文分析系统，也没有拍照的外接口，所以用相机对着目镜拍的，效果不太理性，典型的单个活化的淋巴细胞用黑色箭头标记出来了，至于活化后的图中有些成团的，我一直不清楚为啥会成团，而且也不是每次培养都出现的，用显微镜微调后可以看到很多细胞堆积好几层，有活化的，有不活化的。

sally_no10

我们做混培的时候,活化的淋巴细胞一般来说体积会增大很多.折光有变化.我自己的B细胞(没错,就是我自己的...)活化会比较慢,但是增殖起来体积会增大很多.跟@samly0 老师的图差不多. 一般来说,混培的成团会比较好解释.呵呵.

dragonhzqsmmu

sally_no10 发表于 2013-9-23 20:19

                               
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我们做混培的时候,活化的淋巴细胞一般来说体积会增大很多.折光有变化.我自己的B细胞(没错,就是我自己的...; ...

学习了，看来不只我一个人为了养细胞抽自己的血的