凋亡检测新手帖

bailangningmeng

新手检测凋亡， 这是最高浓度的 样本 但是 我PI检测用的FL3通道  视野下凋亡率超过50%但是流式细胞检测的结果是这样 求大神指导

niwanmao

是否可以把原始数据文件打包传上来？

bailangningmeng

niwanmao 发表于 2014-7-15 10:15
是否可以把原始数据文件打包传上来？

原始数据文件已经上传  谢谢倪老师 指导

叶绿素

既然是测凋亡，应该把门的范围放大，感觉你圈的是一些状态还好点的细胞

bailangningmeng

叶绿素 发表于 2014-7-15 13:51
既然是测凋亡，应该把门的范围放大，感觉你圈的是一些状态还好点的细胞
...

NO gate之后跟这个差不多

niwanmao

bailangningmeng 发表于 2014-7-15 12:24
原始数据文件已经上传  谢谢倪老师 指导

1、看了你的数据，应该是用calibur机器测的，那么PI的通道还是建议你用FL2。
2、从目前数据看，FL3和FL2获得的结果是类似的，但当选择细胞碎片或死细胞区域时，PI居然几乎全阴性，这使得我对你的PI染色有怀疑，是否PI试剂有问题？

bailangningmeng

niwanmao 发表于 2014-7-16 15:21
1、看了你的数据，应该是用calibur机器测的，那么PI的通道还是建议你用FL2。
2、从目前数据看，FL3和FL2获 ...

倪老师 我们用的试剂盒是先用annexin V染色15分钟然后在用PI染色5分钟是否是 PI染色时间短了？  而且您给的图2 和3 差距很大是因为选择通道的问题么？

niwanmao

bailangningmeng 发表于 2014-7-16 17:23
倪老师 我们用的试剂盒是先用annexin V染色15分钟然后在用PI染色5分钟是否是 PI染色时间短了？  而且您给 ...

PI染色时间不会有问题，我是觉得你用的PI染液会不会有问题，所以建议能否从别人那里借一点好的PI染液。
图2 和图3的区别就是纵坐标选择的通道不同，我是建议你把图2调整成图3那样，因为在calibur机器上，FL2还是更好一些。

参考protocol：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-195-1-1.html