表面抗体标记

Kimbryant

全血表面抗体标记，可以先溶血再标抗体吗？还是一定要先加抗体再溶血

niwanmao

相对来说，先加抗体再溶血更好。

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-7-23 21:13
相对来说，先加抗体再溶血更好。

我今天用全血标表面标记没标上，100微升全血加4微升CD4，4度30分钟，加完抗体后我用200微升的枪漩涡混了血，对表面标记有影响吗？还是直接用10微升的枪吸4微升CD4直接加到全血里，不用另外混匀

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-7-23 21:53
我今天用全血标表面标记没标上，100微升全血加4微升CD4，4度30分钟，加完抗体后我用200微升的枪漩涡混了 ...

加了抗体后当然要混匀。至于染不出来，是否为抗体问题？

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-7-23 21:57
加了抗体后当然要混匀。至于染不出来，是否为抗体问题？

还标了8，25，都没标上，应该不是抗体的问题，跟溶血剂有关吗？这个是EBIOSCIENCE的溶血剂。我做的另一个用的beckman溶血剂标了4,8标上了

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-07-23 22:21:54

                               
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还标了8，25，都没标上，应该不是抗体的问题，跟溶血剂有关吗？这个是EBIOSCIENCE的溶血剂。我做的另一个

有可能。可以自配氯化铵裂解液的

Kimbryant

niwanmao 发表于 2014-7-24 07:34
有可能。可以自配氯化铵裂解液的

你好，我用的eBioscience的，表面抗体4度30分钟，然后按说明书100微升的血加2ml的溶血剂，室温10分钟，表面抗体没染上，是温度不够吗？要37度水浴吗？传的是说明书，老师能帮我看下吗？有哪些容易错的地方，是我遗漏什么了吗？说明书上溶血完后直接离心一次去上清，再加PBS洗一次；为什么不是溶血完后加PBS洗啊

niwanmao

Kimbryant 发表于 2014-7-24 09:14
你好，我用的eBioscience的，表面抗体4度30分钟，然后按说明书100微升的血加2ml的溶血剂，室温10分钟，表 ...

CD4、CD8属于非常常见的抗体，一般出问题不太可能，至于孵育条件，基本上不太会影响。建议还是自己配制一点氯化铵裂解液试试，一个个排除。

氯化铵裂解液的配制方法本站有。