固有淋巴细胞的常规流式设门方法易被普通T细胞污染

niwanmao

固有淋巴细胞（ILCs）与T、B细胞不同，它们不表达基因重排抗原受体，然而，目前对于新型ILCs的确定跟辅助T细胞一样，主要还是根据其功能性转录因子和细胞因子来确定。由于缺乏特异性标记，ILCs通常是利用系列标记缺失来圈选，但这种设门方法很容易混入普通T细胞。
在本文中，Burkhard等人利用转录RORc-eYFP的小鼠，发现如果利用常用的CD3排除法设门后，ILC群体会包含大量的含重组TCR及低表达CD3的普通T细胞。因此，作者建议用CD5作为标记来排除T细胞圈选ILCs，以避免普通T细胞的干扰，造成ILCs功能解读上的错误。


(a) Gating strategy for ILC3s in RORc-eYFP mice: after exclusion of doublets, live CD45+ B220− CD3− TCRβ− YFP+ cells were selected. (b) The population gated in panel a contains a significant fraction of CD5+ cells both in spleen, lung and colon. (c) In RORc-eYFP-RAG−/− mice all YFP+ CD45+ live cells stain negative for CD3, TCRβ and also CD5. Representative plots for n = 3 (mean +/− s.e.m.).



全文链接：http://www.plosone.org/article/i ... ournal.pone.0094196
原文标题和信息：

PLoS One. 2014 Apr 23;9(4):e94196. doi: 10.1371/journal.pone.0094196. eCollection 2014.
T cell contamination in flow cytometry gating approaches for analysis of innate lymphoid cells.
Burkhard SH, Mair F, Nussbaum K, Hasler S, Becher B.