关于细胞增殖Brdu分析采用平均荧光强度的问题

xzlly1234 · 发表于 2014-9-12 11:06:45

本帖最后由 xzlly1234 于 2014-9-17 09:37 编辑

大家好，想咨询下有没有做brdu增殖的，我用brdu处理的步骤是在细胞贴壁24h，加Brdu和促增殖药物，共培养3天，流式结果分析对照组和加药组阳性细胞率几乎接近100%,但是加药组的荧光强度明显高于对照组的，加药组的横坐标较对照组的偏右，所以想请教大家，这个具体怎么分析啊，刚开始做流式，不熟悉，谢谢了

niwanmao · 发表于 2014-9-12 20:50:29

以第3管为对照，在FITC/SSC散点图上画出如下对照门，然后又此门为标准，读取4、5、6三个文件的比例即可。参见下图：

xzlly1234 · 发表于 2014-9-14 11:23:00

老师，不好意思，我还是看不懂，我是fitc标记的，我就是想了解下，Brdu的增值率，横坐标不应该是fitc-a么，纵坐标我用的是histogram啊，分析得到是是一个类似抛物线的峰型

wynbzxm · 发表于 2014-9-14 12:14:26

加药组的横坐标较对照组的偏右
那么门应该怎么选择呢？

niwanmao · 发表于 2014-9-14 19:28:50

xzlly1234 发表于 2014-9-14 11:23
老师，不好意思，我还是看不懂，我是fitc标记的，我就是想了解下，Brdu的增值率，横坐标不应该是fitc-a么， ...

你做的图形，用散点图分析更好圈，如果用直方图，分界不清，不好。
图形类型没有关系，关键是结果正确就行。

niwanmao · 发表于 2014-9-14 19:29:27

wynbzxm 发表于 2014-9-14 12:14
加药组的横坐标较对照组的偏右
那么门应该怎么选择呢？

什么横坐标？

xzlly1234 · 发表于 2014-9-17 09:40:43

niwanmao 发表于 2014-9-14 19:29
什么横坐标？

老师，我上传了我分析的图，横坐标是FITC-A,纵坐标是Histogram,与对照组2,3相比，4，5,6横坐标偏右，是不是说明其荧光强度强于对照组1,2呢，那么也就说明增殖了呢，我实在不懂哎

niwanmao · 发表于 2014-9-17 20:44:07

xzlly1234 发表于 2014-9-17 09:40
老师，我上传了我分析的图，横坐标是FITC-A,纵坐标是Histogram,与对照组2,3相比，4，5,6横坐标偏右，是不 ...

你的结果适合用我前面给你的散点图分析，这是可以的，直方图分不好。

xzlly1234 · 发表于 2014-9-19 09:35:34

niwanmao 发表于 2014-9-17 20:44
你的结果适合用我前面给你的散点图分析，这是可以的，直方图分不好。

好的，谢谢老师，我看看相关流式的书，不懂的再问您

xzlly1234 · 发表于 2014-9-25 11:09:43

niwanmao 发表于 2014-9-12 20:50
以第3管为对照，在FITC/SSC散点图上画出如下对照门，然后又此门为标准，读取4、5、6三个文件的比例即可。参 ...

老师，按照您说的设门，图是这样么，但我有一个问题，就是我的图的纵坐标和您的不一样，不知道怎么设置，设置了半天也改不成您那样的效果，我的图整个有点偏右下方，不知道怎么调整为偏左上方，再次麻烦您了，我分析的图上传到流式结果2中了，真的谢谢您

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