流式检测ROS的阴性对照问题

心如止水De妞妞 · 发表于 2017-11-22 14:39:07

各位老师好，我用的是流式细胞仪检测细胞的活性氧水平，用的是碧云天的试剂盒，前期一般准备三管细胞

1.纯细胞，什么也不加

2.细胞+DCFH-DA探针

3.细胞+DCFH-DA探针+活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/ml) ---------阳性对照

疑问是：第一管和第二管哪一个是阴性对照呢？

若是文章中做比较的话，应该选择哪个作为阴性对照组呢

心如止水De妞妞 · 发表于 2017-11-23 10:49:35

额~请各位大神帮忙解决一下吧

niwanmao · 发表于 2017-11-24 08:03:12

第1管不算对照，只能是算做调节电压的参考品，绝对不能用于设门。

理想的阴性对照是不表达某标记的细胞，但由于活性氧正常细胞不可能一点都没有，所以需要用N-acetylcysteine (NAC) 诱导抗氧化作用，作为阴性对照细胞。

心如止水De妞妞 · 发表于 2017-11-30 14:28:41

niwanmao 发表于 2017-11-24 08:03
第1管不算对照，只能是算做调节电压的参考品，绝对不能用于设门。

理想的阴性对照是不表达某标记的细胞， ...

好的，非常感谢老师！

芒果果haha · 发表于 2018-10-19 10:26:10

ROS的阳性对照你做出来了吗，为什么我的阳性对照的平均荧光强度比对照染色的平均荧光强度还要低

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