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绝对计数BD Trucount

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发表于 2018-10-10 01:32:28 来自手机 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏10流星未解决
想做脊髓流式浸润单核巨噬的绝对计数 但制备单细胞悬液时各组之间细胞总数不一致 染色过程还要清洗 这样能做绝对计数吗 感觉只是相对计数 还不准确 不知道是否可行 小白求助高手

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发表于 2018-10-10 21:45:03 | 显示全部楼层
洗涤倒是问题不大,只要去上清的时候,尽量多留液体,不太会丢失。
但是制备单细胞悬液的时候,处理成单细胞的效率,会比较容易受影响,而且你使用的脊髓体积如何测量呢
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 楼主| 发表于 2018-10-10 23:18:14 来自手机 | 显示全部楼层
十分感谢倪老师的回复!我们是比较各实验组MDM绝对数的变化 可是我们没办法控制一个各组比较的标准前提 假设我们称相同重量的腰膨大去分离中枢神经系统的单个核细胞的话 但percoll分离后各组之间吸上来的细胞就不一致 怎么控制各实验组之间的可比性呢
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发表于 2018-10-11 08:26:20 | 显示全部楼层
普鲁卡因 发表于 2018-10-10 23:18
十分感谢倪老师的回复!我们是比较各实验组MDM绝对数的变化 可是我们没办法控制一个各组比较的标准前提 假 ...

我个人的建议:
称取相同重量的腰膨大之后,用机械法制备单细胞悬液,显微镜下计数总细胞量。最后检测直接分析百分比,乘以之前计算出的总细胞量,就可得各类细胞的绝对数。
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 楼主| 发表于 2018-10-11 21:50:31 | 显示全部楼层
谢谢倪老师~既然不用计数管精确来计数 算出外周浸润的单核巨噬在所有单个核细胞的比例来分析应该就可以了吧
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发表于 2018-10-11 23:33:42 | 显示全部楼层
普鲁卡因 发表于 2018-10-11 21:50
谢谢倪老师~既然不用计数管精确来计数 算出外周浸润的单核巨噬在所有单个核细胞的比例来分析应该就可以了 ...

是的
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 楼主| 发表于 2018-10-12 19:35:06 来自手机 | 显示全部楼层
嗯嗯 感谢倪老师的解答
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