抗CD3/抗CD28刺激，那要刺激多久，刺激完后要再用PMA/Ion/BFA...

xuepingyu180 · 发表于 2018-10-16 11:56:43

倪老师好，用流式检测细胞因子，如果有PMA/Ion/BFA刺激5h后，可直接胞内染色上机检测。那如果我是想用抗CD3/抗CD28刺激，那要刺激多久，刺激完后要再用PMA/Ion/BFA刺激5h后再胞内染色吗？

niwanmao · 发表于 2018-10-16 15:49:37

可以任选一种。

mybiosciences · 发表于 2018-10-18 15:58:22

有特异性抗原就用特异性抗原（比如蛋白或者细菌裂解液等等）可以同时加上CD28提供第二信号。
没有的话就用CD3CD28刺激，提供第一第二信号，我不赞同加pma/ino，这个刺激应该看做是阳性对照

mybiosciences · 发表于 2018-10-18 16:00:53

当然，还要看你的实验目的，比如动物注射或者灌了一种蛋白，要看之后整个免疫的反应变化（不仅仅是对此蛋白的反应），恐怕就需要用CD3CD28刺激了

xuepingyu180 · 发表于 2018-11-12 12:41:19

恩，谢谢两位专家的建议。可以用抗CD3/抗CD28刺激及BFA封闭5h后，再胞内染色吗？

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