树突状细胞的设门及表型问题

zhoulijanice

我在对DC流式表型结果进行数据分析时，有如下问题向老师们请教：
1、在对DC进行设门时，不知道我圈的这一块是否是树突状细胞，求老师指点一下，谢谢（图1）。
2、根据图1的设门，得出来CD14和CD11c的图如图2，我该如何划区？像图2中划十字不知是否合适？
3、培养过程中光镜下能看到较多具有明显树突状特征的DC细胞形态，但做了3次成熟DC的流式表型，3次成熟DC的CD14都很高没降下去，同时做了未成熟DC的流式检测，成熟DC对比未成熟的树突状细胞CD14略降了些，但还是很高。另外尝试圈图1中FSC和SSC最大的那群细胞，CD14更高（如图3），不知道这个情况是否属于正常情况？
4、下图CD14高除去培养过程的问题外，在流式操作过程中我该注意什么问题来把CD14降下去？
谢谢各位老师的解答。
图1：

图1：设门

图2：

图2：划区

图3：

图3

niwanmao

从图2和图3看，你目前圈的所谓DC门实际上应该是淋巴细胞门。图3对应的门才是单核细胞门。你圈的DC应该在单核细胞门附近 。

现在看来，CD11c和CD14表达都很高，是没分化出来的。关注的还是培养诱导体系。

zhoulijanice

niwanmao 发表于 2019-1-6 12:16
从图2和图3看，你目前圈的所谓DC门实际上应该是淋巴细胞门。图3对应的门才是单核细胞门。你圈的DC应该在单 ...

好的，谢谢倪老师！

小外星人

图三是否为单核来源的树突？