内皮祖细胞标记

bravegao

最近给个学生做实验，她想标出心梗患者的CD34+.CD133+,VEGF+都阳性的内皮祖细胞，但做出来后也不知道是补偿还电压之类的没调好，结果就是不太满意 ，什么都没标的都有点阳性表达，这方面没怎么做过，不知应是怎么作图，有相关的图形分析吗？

niwanmao

首先，用CD45-SSC或FSC-SSC设门，圈淋巴细胞区域R1。
其次，画CD34/CD133和CD133/VEGF的双坐标点图，逐级设双阳性门R2和R3。
最后，用逻辑门组合R1 AND R2 AND R3，可得到三个标记均阳性的细胞。

另外，你可参考：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2893245/

bravegao

牛人就是牛人，谢谢！

   

sfqiang23

老师你好，我想标记CD45-CD34+CD133+VEGF+的内皮祖细胞怎么画图？谢谢

niwanmao

sfqiang23 发表于 2011-11-4 00:58

                               
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老师你好，我想标记CD45-CD34+CD133+VEGF+的内皮祖细胞怎么画图？谢谢

画三个图，CD45/SSC、CD34/CD133、CD133/VEGF，设门步骤同本帖的“沙发”（http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... =1140&fromuid=1）
只是你要圈的是CD45－的细胞，就不能圈淋巴细胞这群了。

sfqiang23

不知这样画图怎么样？
1.FSC-SSC设门，圈淋巴细胞区域R1
2画CD45--CD34散点图(Gate=R1)中圈CD45-CD34+的细胞设门R2
3画CD133--VEGF散点图（gate=R2），双阳性细胞即为CD45-CD34+CD133+VEGF+    ？

niwanmao

sfqiang23 发表于 2011-11-7 21:53

                               
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不知这样画图怎么样？
1.FSC-SSC设门，圈淋巴细胞区域R1
2画CD45--CD34散点图(Gate=R1)中圈CD45-CD34+的细 ...

如果能够确定内皮干祖细胞位于淋巴细胞位置，这样也是可以的。但是建议还是按照我这样，可以防止遗漏一些fsc或ssc较大的细胞。

sfqiang23

谢谢站长，感觉你说的很有道理，采纳了，今天我按照你说的这种方法画了做了个模板，等下次实验时用。

niwanmao

sfqiang23 发表于 2011-11-7 22:29

                               
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谢谢站长，感觉你说的很有道理，采纳了，今天我按照你说的这种方法画了做了个模板，等下次实验时用。 ...

共同进步

lpxfl

老师，您好，我也在研究内皮祖细胞，我想请教下您，我想鉴定CD34 CD133 VEGF CD144，我该怎么设门呢，谢谢