jc-10检测细胞膜电位补偿调节

michellefei2010 · 发表于 2019-4-18 13:57:22

本帖最后由 michellefei2010 于 2019-4-18 14:10 编辑

各位老师好

我用jc-10检测细胞膜电位，发现以下问题：

1. CCCP处理阳性对照，37度处理30分钟，但是没有测到FL2降低的一群细胞。

2. 有些实验组得到FL1和FL2都降低的一群细胞。

3. 我的流式图补偿调的对吗？

谢谢！

michellefei2010 · 发表于 2019-4-18 14:05:36

本帖最后由 michellefei2010 于 2019-4-22 20:10 编辑

令人纳闷的实验结果，好奇怪

h951595223 · 发表于 2019-4-19 16:03:20

你这结果明显不对。阳性组分群明显，你先确定样本处理过程是否有误，阳性组膜电位结果图如下

michellefei2010 · 发表于 2019-4-22 20:16:23

培养的贴壁细胞，按protocol阳性对照组加cccp处理30分钟后，所有组用胰酶消化，加1*jc-10工作液，培养箱孵育30分钟，然后用pbs洗两遍，上机。我也不知哪里没有处理正确

niwanmao · 发表于 2019-4-22 20:37:43

michellefei2010 发表于 2019-4-22 20:16
培养的贴壁细胞，按protocol阳性对照组加cccp处理30分钟后，所有组用胰酶消化，加1*jc-10工作液，培养箱孵 ...

降低JC-10用量试试，做个梯度。

我爱学习 · 发表于 2019-4-23 02:16:39

JC-1染完色要尽快上机检测，时间久了就没有任何变化了，就是你图上的结果的样子

tiger · 发表于 2019-4-23 09:11:48

你调一下补偿试试，阴性对照组样品也可能大都在第四象限。我怀疑是细胞状态不好，因为JC太敏感了。还有一定要用有损伤的细胞调补偿，贴壁细胞的上清也要收集，因坏死细胞漂浮，早期凋亡细胞贴壁不牢。丢弃了这些细胞，造成假阴性。

michellefei2010 · 发表于 2019-4-24 12:38:33

明白啦，谢谢大家

账号		自动登录	找回密码
密码			加入流式中文网

[标本处理] jc-10检测细胞膜电位补偿调节