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[试剂耗材] 抗体相关问题

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发表于 2019-9-23 14:15:13 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
请问倪老师,我在用CCR7染外周血PBMC时发现CCR7的抗体不好使(4度,30分钟,避光),没有明显的分群,感觉是没染上,倪老师有推荐的CCR7抗体吗?还有染CCR7需要特殊条件吗,比如温度,时间?

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发表于 2019-9-23 18:04:19 | 显示全部楼层
我平时做的挺好啊。你用的是什么克隆和荧光素的?
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 楼主| 发表于 2019-9-24 10:05:30 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-9-23 18:04
我平时做的挺好啊。你用的是什么克隆和荧光素的?

克隆号:3D12,荧光素Super Bright 600,thermo的
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发表于 2019-9-25 14:13:09 | 显示全部楼层
ssf5910 发表于 2019-9-24 10:05
克隆号:3D12,荧光素Super Bright 600,thermo的

我用的是PE 标记 ,Clone:G043H7
以前也有站友问过,后来沟通之后,推荐他将CCR7和CD45RA搭配在一起,做散点图,就可以看出明显的分成4群。
此外,样本一定要新鲜,切勿固定切勿固定。
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发表于 2019-10-9 15:13:20 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-9-25 14:13
我用的是PE 标记 ,Clone:G043H7
以前也有站友问过,后来沟通之后,推荐他将CCR7和CD45RA搭配在一起,做 ...

老师说“切勿固定”是固定对哪个指标有影响?CD45RA还是CCR7,是怎么样的影响呢?
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发表于 2019-10-10 07:55:02 | 显示全部楼层
wenyi.zheng 发表于 2019-10-9 15:13
老师说“切勿固定”是固定对哪个指标有影响?CD45RA还是CCR7,是怎么样的影响呢? ...

CCR7,部分克隆可能容易出现降低或阴性。
CD45RA不影响。
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