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[其它临床检测] 如何判断弱阳性细胞

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发表于 2019-10-11 16:02:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
小白提问。
  目前在检测中,检测出细胞分群。第一个问题,圈门如图所示,是根据实际细胞分群而定,还是根据同型对照来定义?
第二个问题,为什么电压调高后,样本的阴性细胞群荧光信号增强,ISO的细胞荧光强度不变?
第三个问题,怀疑阴性细胞中,有一部门弱阳性的细胞,应该如何设计实验去验证?
希望各位老师能解答一下~

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发表于 2019-10-11 17:02:20 | 显示全部楼层
1. 对于这种分群清晰的群,我觉得按照实际分群圈门比较好。对于你的样本背景增强,a 是否是收完blank后你调高了APC通道的电压?FMO对照要在相同的条件下进行吧;b APC通道的抗体是否使用的浓度太高;c 细胞染色前未使用FcR blocking reagent封闭.
2. 调高通道电压就会使所有的细胞信号增强,包括阴选细胞,所以获取时中间不能调电压。
3. 你的阴阳性群靠的比较进,可以考虑增强阳性群的荧光强度,比如滴定抗体,换荧光素等。至于是否有弱阳性群就不清楚了。
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发表于 2019-10-11 21:58:25 | 显示全部楼层
设门,最佳是生物学对照,其次是FMO对照(Fc阻断)。
电压调高后,你这里的阴性和isotype都会增高,只是你用的仪器本身性质导致你觉得不变。
阴性细胞群里面,怎么会包含弱阳性?如果是弱阳性,肯定是超出阴性区域啊,用正确的对照就能比较的出来。
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发表于 2019-10-15 10:43:20 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-11 21:58
设门,最佳是生物学对照,其次是FMO对照(Fc阻断)。
电压调高后,你这里的阴性和isotype都会增高,只是你 ...

那这么说是阳性群吗
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发表于 2019-10-15 22:12:17 | 显示全部楼层
鬼鬼未影 发表于 2019-10-15 10:43
那这么说是阳性群吗

与正确的阴性对照对比,只要冒出头的,就算阳性,只是强弱不等。
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