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标题: 自配溶血素 [打印本页]

作者: nsync4 时间: 2012-10-17 22:50
标题: 自配溶血素
各位老师，有没有自配的溶血素？我们一直是自己配制，都是碳酸氢钠和氯化铵，用的还可以。最近不知道怎么回事，开始用的还好，后来越来越差，试剂和蒸馏水都没有换过，蒸馏水的PH值也没有明显变化，好头疼，请各位老师赐教。

作者: niwanmao 时间: 2012-10-18 06:22

nsync4 发表于 2012-10-17 22:50:19

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各位老师，有没有自配的溶血素？我们一直是自己配制，都是碳酸氢钠和氯化铵，用的还可以。最近不知道怎么回事，开始用的还好，后来越来越差，试剂和蒸馏水都没有换过，蒸馏水的PH值也没有明显变化，好头疼，请各位

是按照这个配方吗？ http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-178-1-1.html

效果怎么个差法？裂解不干净？

作者: nsync4 时间: 2012-10-21 20:16
没有加EDTA-2Na，它的作用？好像裂解的有些过了，粒细胞的FS降的很厉害，求解各位老师。

作者: niwanmao 时间: 2012-10-21 21:14

nsync4 发表于 2012-10-21 20:16

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没有加EDTA-2Na，它的作用？好像裂解的有些过了，粒细胞的FS降的很厉害，求解各位老师。 ...

EDTA二钠一般是作为血液抗凝剂，真正作用不详，但应该有稳定作用，而且这个配方我用了8年，肯定没有问题，建议加上去试试。

作者: vtea 时间: 2012-11-5 20:23
人和鼠的红细胞裂解液配方一样吗？裂解要求一样吗？

作者: niwanmao 时间: 2012-11-5 22:22

vtea 发表于 2012-11-5 20:23

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人和鼠的红细胞裂解液配方一样吗？裂解要求一样吗？

应该有点不一样的。人的标本用氯化铵裂解液效果没问题，已经用了8年了：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-178-1-1.html

至于小鼠的，之前有帖子讨论过，可以用Tris-NH4Cl裂解液：
http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1501-1-1.html

作者: vtea 时间: 2012-11-22 18:17

谢谢老师！

作者: baolei0606 时间: 2014-5-16 21:28

niwanmao 发表于 2012-10-21 21:14
EDTA二钠一般是作为血液抗凝剂，真正作用不详，但应该有稳定作用，而且这个配方我用了8年，肯定没有问题 ...

溶血素和红细胞裂解液一样吗？流式可以用索莱宝的红细胞裂解液吗？

作者: niwanmao 时间: 2014-5-16 21:31

baolei0606 发表于 2014-5-16 21:28
溶血素和红细胞裂解液一样吗？流式可以用索莱宝的红细胞裂解液吗？

溶血素就是红细胞裂解液。索莱宝是啥公司？自己配就行了，无需买。

作者: chymanhz 时间: 2014-5-17 00:40
溶血素配方和仪器有一定的关系，像BD就退出来2款溶血素，针对自己仪器和贝克曼的仪器，可以看到同一溶解素在不同仪器上使用出来的效果其实不一样的，尤其是在FSC/SSC plot上。

作者: 木棉大叔 时间: 2014-5-18 20:09
商品化的溶血素一般是针对于人的，用在小鼠上试过不行。

作者: haven_t 时间: 2014-5-19 08:05

chymanhz 发表于 2014-5-17 00:40
溶血素配方和仪器有一定的关系，像BD就退出来2款溶血素，针对自己仪器和贝克曼的仪器，可以看到同一溶解素 ...

我只知道一种是BD-phamigen科研性质不带固定效果的，另一种是BDIS临床使用带固定效果的，真的不知道还有针对仪器一说哦。

作者: chymanhz 时间: 2014-5-20 09:10

haven_t 发表于 2014-5-19 08:05
我只知道一种是BD-phamigen科研性质不带固定效果的，另一种是BDIS临床使用带固定效果的，真的不知道还有 ...

我不是记得很清楚了，就是有个C的是BD给贝克曼仪器做的溶血素，有个·D的是给BD自己仪器用的

作者: epguan 时间: 2015-11-9 10:24

chymanhz 发表于 2014-5-17 00:40
溶血素配方和仪器有一定的关系，像BD就退出来2款溶血素，针对自己仪器和贝克曼的仪器，可以看到同一溶解素 ...

是不是，不同的溶血素对抗体结合到表面抗原的影响不一样？

作者: 小憨 时间: 2015-11-9 11:22
氯化铵和碳酸氢钠应该容易形成碳酸铵，然后以氨气和二氧化碳的形式挥发出来，我觉得这个是它不稳定的原因，之前倪老师也说过配成10× 4℃保存能延长使用寿命。
另外氯化铵和碳酸氢钠都是易吸水潮解的物质，如果长时间放着又不密封保存的话，它的摩尔质量就改变啦，你称的时候要适当多加一些才行，或者直接买水合的氯化铵和碳酸氢钠得了

作者: niwanmao 时间: 2015-11-9 12:25

epguan 发表于 2015-11-9 10:24
是不是，不同的溶血素对抗体结合到表面抗原的影响不一样？

可能会有不同影响，但是不会相差太大，否则就不能作用商品化产品出售了。

作者: chymanhz 时间: 2015-11-9 22:58

epguan 发表于 2015-11-9 10:24
是不是，不同的溶血素对抗体结合到表面抗原的影响不一样？

不是，不同溶血素配方有点差异，导致裂解后的碎片以及白细胞的形态有差异，这个差异结合FSC的遮光棒设计会导致3群分群的差异。最终出来的结果分布会不太一样。

作者: zzj202 时间: 2015-11-18 09:48

niwanmao 发表于 2012-10-18 06:22
是按照这个配方吗？ http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-178-1-1.html

效果怎么个差法？裂解不干净？ ...

请问，倪老师，这个配方，1：20裂解室温下裂解，大概裂解多长时间？

作者: niwanmao 时间: 2015-11-18 10:59

zzj202 发表于 2015-11-18 09:48
请问，倪老师，这个配方，1：20裂解室温下裂解，大概裂解多长时间？

这个氯化铵裂解液配方是10×的，不是20×。
裂解时间室温下10分钟。

作者: epguan 时间: 2015-11-18 11:03

chymanhz 发表于 2015-11-9 22:58
不是，不同溶血素配方有点差异，导致裂解后的碎片以及白细胞的形态有差异，这个差异结合FSC的遮光棒设计 ...

受教了，非常感谢！

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