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标题: 流式检测Treg细胞 [打印本页]

作者: zxxfighting 时间: 2014-4-7 09:19
标题: 流式检测Treg细胞
各位老师，我刚开始接触流式，最近检测的人外周血CD4+CD25+CD127loFoxp3+Treg细胞的表型中，发现CD4的阳性率比CD127的阳性率都还要高，并且CD4的阳性率才20%多一点。我用的是ebioscience的抗体，不知道这是什么原因？

此外，Treg和Th17细胞的各个表型的阳性率的大概范围是多少呢？求解答

作者: niwanmao 时间: 2014-4-7 10:08
1、CD4＋的比例20％似乎还是可以接受的，不知道你的图形是怎么样的，如有可能是否能上传？
2、Treg的比例参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3075-1-1.html， Th17的比例似乎还没看到。

作者: zxxfighting 时间: 2014-4-7 22:07

niwanmao 发表于 2014-4-7 10:08
1、CD4＋的比例20％似乎还是可以接受的，不知道你的图形是怎么样的，如有可能是否能上传？
2、Treg的比例参 ...

我还没有做完，只做了部分单染

作者: niwanmao 时间: 2014-4-8 09:05

zxxfighting 发表于 2014-4-7 22:07
我还没有做完，只做了部分单染

哦，用C6做的。这个FSC/SSC散点图似乎有点奇怪，你圈的R1会不会是单核细胞？

作者: zxxfighting 时间: 2014-4-8 09:38

niwanmao 发表于 2014-4-8 09:05
哦，用C6做的。这个FSC/SSC散点图似乎有点奇怪，你圈的R1会不会是单核细胞？ ...

这个我也不是很清楚，是老师帮我做的。
会不会是目的区域放大的不够，淋巴细胞的亚群还没有出来呢？

作者: niwanmao 时间: 2014-4-8 19:15

zxxfighting 发表于 2014-4-8 09:38
这个我也不是很清楚，是老师帮我做的。
会不会是目的区域放大的不够，淋巴细胞的亚群还没有出来呢？ ...

放大是够的，但是圈门似乎有问题，一方面圈的太大，另一方面现在仔细想想，似乎T细胞比例很低，不知道附近的单核混进去了？另外，这个外周血标本是正常人还是病人的？

作者: zxxfighting 时间: 2014-4-9 08:20

niwanmao 发表于 2014-4-8 19:15
放大是够的，但是圈门似乎有问题，一方面圈的太大，另一方面现在仔细想想，似乎T细胞比例很低，不知道附 ...

是正常人的

作者: 美猫秀秀 时间: 2014-4-17 21:15
倪老师这是我检测的treg，似乎没染上。能帮我看看是什么问题么？谢谢

作者: 小灰 时间: 2014-4-17 21:46
如果你是分的PBMC做的，R1肯定不对，似乎是SSC电压太高。
如果你是CD3抗体加白介素刺激培养过的细胞，那这个图就差不多可以了。
你发上来的图有加逻辑关系了吗？怎么三个都是R1出来的单阳性？

作者: 小灰 时间: 2014-4-17 21:50
临床上来讲，CD4绝对计数小于200，可诊断为艾滋病。其余的值都算正常，并不能说明什么问题。CD4/CD8比值用来评估人的免疫水平，才有一定临床意义

作者: 小灰 时间: 2014-4-17 21:53
白细胞中淋巴细胞含量差不多在10%左右，你选的R1应该差不多是淋巴。SSC太大，图不好看，R1门大了点

作者: zxxfighting 时间: 2014-4-18 09:17

小灰发表于 2014-4-17 21:53
白细胞中淋巴细胞含量差不多在10%左右，你选的R1应该差不多是淋巴。SSC太大，图不好看，R1门大了点 ...

那反应在图上是不是就是说圈的R1细胞大概是10%呢

作者: zxxfighting 时间: 2014-4-18 09:20

niwanmao 发表于 2014-4-8 09:05
哦，用C6做的。这个FSC/SSC散点图似乎有点奇怪，你圈的R1会不会是单核细胞？ ...

倪老师，我做双染或三染的时候，用了同型对照，还需不需要调补偿？

作者: niwanmao 时间: 2014-4-18 11:23

zxxfighting 发表于 2014-04-18 09:20:41

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倪老师，我做双染或三染的时候，用了同型对照，还需不需要调补偿？

同型对照和补偿无关，补偿当然要调的:)

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