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标题: 有没有对植物,水产倍性分析感兴趣的flower？ [打印本页]

作者: landinsky 时间: 2016-9-24 09:39
标题: 有没有对植物,水产倍性分析感兴趣的flower？
我是专业做植物，水产倍性分析工作的，这方面的帖子在论坛属于小众话题，大家有问题欢迎交流，希望可以帮到大家。

作者: niwanmao 时间: 2016-9-24 10:32
植物和水产方面的确实小众，但我们还是很感兴趣的，@landinsky 站友能否分享一下植物和水产的倍体检测实验步骤和哺乳动物是否一样？你们的倍体对照是采用什么？

作者: landinsky 时间: 2016-9-24 11:00
好的，我会再写一下植物倍性分析的步骤，我是专门做小众流式分析的

作者: 我爱学习 时间: 2016-9-25 22:33
感兴趣，可以分享下protocol和数据分析方法吗，非常感谢。

作者: landinsky 时间: 2016-10-4 10:56
请问你是做植物还是水产？

作者: 我爱学习 时间: 2016-11-7 22:32

landinsky 发表于 2016-10-4 10:56
请问你是做植物还是水产？

植物倍性分析，样品处理难道就是大部分流程写的，加缓冲液，切切切切切，过滤，染PI，上机检测，做了几次，red-A和red-B都出不来，是不是样本没处理好

作者: 库库哈 时间: 2018-4-25 10:01
老师，您好，我现在需要做植物的DNA含量检测，需要做成细胞核悬液，还是细胞悬液？另外，标准品的选择，要怎么选呢？鸡血红细胞对于植物会不会差异太大了呢？

作者: niwanmao 时间: 2018-4-25 17:36

库库哈发表于 2018-4-25 10:01
老师，您好，我现在需要做植物的DNA含量检测，需要做成细胞核悬液，还是细胞悬液？另外，标准品的选择，要 ...

可以用鸡血细胞，具体参见：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10330063

作者: 库库哈 时间: 2018-4-26 17:48

niwanmao 发表于 2018-4-25 17:36
可以用鸡血细胞，具体参见：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10330063

好的，谢谢老师。鸡血红细胞，一直没有找到卖的，是不是都是自己做的？

作者: niwanmao 时间: 2018-4-27 08:06

库库哈发表于 2018-4-26 17:48
好的，谢谢老师。鸡血红细胞，一直没有找到卖的，是不是都是自己做的？ ...

买只鸡，取鸡血，剩下的自己烧了吃

作者: 允一笑而过 时间: 2018-12-6 15:03
最近要做植物的倍性分析，有没有相关的样本处理以及流式检测的步骤可以分享一下呢？谢谢！

作者: landinsky 时间: 2019-1-24 14:42
用什么流式做？

作者: 648669086 时间: 2019-2-2 07:32

允一笑而过发表于 2018-12-6 15:03
最近要做植物的倍性分析，有没有相关的样本处理以及流式检测的步骤可以分享一下呢？谢谢！ ...

楼上说的加裂解液，切切切……，难点和关键点就是制备核悬浮液，也就是裂解液的选择，初次做必须得摸索裂解液种类及作用时间。

作者: 648669086 时间: 2019-2-2 07:33

landinsky 发表于 2019-1-24 14:42
用什么流式做？

PI染色，市面上的流式细胞仪都能检测。

作者: niwanmao 时间: 2019-2-2 08:16

648669086 发表于 2019-2-2 07:32
楼上说的加裂解液，切切切……，难点和关键点就是制备核悬浮液，也就是裂解液的选择，初次做必须得摸索裂 ...

不同植物裂解液也不同吗？有没有什么经验配方可以分享？

作者: 1277258384 时间: 2019-2-11 10:04
我也是做植物倍性分析的

作者: 1277258384 时间: 2019-2-11 10:06
我们仪器是配备的是488和633的激发器，用pi染色，PE检测。但看不到荧光信号，是不是太弱了检测不到？希望老师指导

作者: niwanmao 时间: 2019-2-11 18:21

1277258384 发表于 2019-2-11 10:06
我们仪器是配备的是488和633的激发器，用pi染色，PE检测。但看不到荧光信号，是不是太弱了检测不到？希望老 ...

这个问题太笼统，首先是样本有没有处理好，PI有没有染上，这是一个问题，其次是滤光片的配置，PE的滤光片是否最佳。

作者: c878094046 时间: 2019-2-15 19:02

niwanmao 发表于 2018-4-27 08:06
买只鸡，取鸡血，剩下的自己烧了吃

我做的时候就是用了几次，然后烧了吃了

作者: landinsky 时间: 2019-3-16 16:08

1277258384 发表于 2019-2-11 10:06
我们仪器是配备的是488和633的激发器，用pi染色，PE检测。但看不到荧光信号，是不是太弱了检测不到？希望老 ...

488的仪器，用PI染色，我估计你的设门有问题，是不是看不到被染色的细胞核在哪里？

作者: landinsky 时间: 2019-3-16 16:09

允一笑而过发表于 2018-12-6 15:03
最近要做植物的倍性分析，有没有相关的样本处理以及流式检测的步骤可以分享一下呢？谢谢！ ...

做倍性分析，选择不同的仪器，检测通量不同。如果用488激光+PI染料，样本处理加检测，大概20分钟一个样本。如果样本量大，可以找配备365nm激光+DAPI染料的仪器，一分钟做完一个样本，更适合大量检测。

作者: qingshi 时间: 2019-5-2 23:01

landinsky 发表于 2019-3-16 16:08
488的仪器，用PI染色，我估计你的设门有问题，是不是看不到被染色的细胞核在哪里？ ...

对的，老师怎么确定细胞核位置？

作者: wmj123456 时间: 2024-10-13 19:29

landinsky 发表于 2019-3-16 16:09
做倍性分析，选择不同的仪器，检测通量不同。如果用488激光+PI染料，样本处理加检测，大概20分钟一个样本 ...

老师，请问下，做植物倍性分析，用的C6仪器，是比较容易堵吗？避免堵塞可以有哪些好的经验分享呢？

作者: hongrui 时间: 2024-10-14 11:18

wmj123456 发表于 2024-10-13 19:29
老师，请问下，做植物倍性分析，用的C6仪器，是比较容易堵吗？避免堵塞可以有哪些好的经验分享呢？ ...

可以过个筛网，然后在上机前混匀一下

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