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标题: 问一个老问题：同型对照到底用还是不用？ [打印本页]

作者: 小憨 时间: 2017-11-16 18:16
标题: 问一个老问题：同型对照到底用还是不用？
最近投了篇文章，关于T细胞的胸腺发育的，检测了CD127（IL-7受体）和Bcl-2（核内染色），被reviewer argue为什么不用isotype control……其实在我自己的实验中，我发现淋巴细胞isotype control跟blank control（什么抗体都不加）其实差不多，所以后续实验都没有做isotype control。不知道大家对此有什么看法，欢迎批评指正，也希望各位flower能够提供相关文献支持你们的观点。同时，我也会继续查找文献，如果找到有关资料，也会在此跟大家分享。

作者: robert1988 时间: 2017-11-17 03:46
DOI: 10.1002/eji.201646632， Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting
in immunological studies，里面一些流式大牛写了一些指导性的意见，有兴趣自己翻翻。

关于你的问题，上述文献的回答可以归纳为：没用。

作者: niwanmao 时间: 2017-11-17 08:11
为发表文章：用。

实际上：真没用。
如果你要找证据，可以用这篇：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5895-1-1.html，你就解释说你用过Fc Blocking了

作者: 小憨 时间: 2017-11-20 20:17

niwanmao 发表于 2017-11-17 08:11
为发表文章：用。

实际上：真没用。

倪老师，我找到了两篇文献，是一个流式专家的blog上看到的，总结了isotype的缺陷什么的，给大家贴上哈：
1. Hulspas R, O’Gorman MRG, Wood BL, Gratama JW, Sutherland DR. Considerations for the control of background fluorescence in clinical flow cytometry. Cytometry Part B 2009; 76B: 355–364.
2. 第二篇给大家提供个地址，DOI: 10.1002/cyto.a.20333

作者: niwanmao 时间: 2017-11-22 08:27

小憨发表于 2017-11-20 20:17
倪老师，我找到了两篇文献，是一个流式专家的blog上看到的，总结了isotype的缺陷什么的，给大家贴上哈：
...

是的，同型对照的观点以前深入人心，但如果注意行业发展的话，就会知道同型对照并不能作为设门依据，这位评审就不会提出如此愚蠢的问题了。
这两篇文献可以作为你的证据的。

作者: mybiosciences 时间: 2018-10-18 16:12
我现在给客户做方案基本都不用了
可以做fmo对照划门

作者: mybiosciences 时间: 2018-10-18 16:14
去年的问题

作者: 流传疯 时间: 2018-10-19 10:55
慢慢学习中

作者: 小外星人 时间: 2019-5-16 03:18
如果是胞内的细胞因子呢？也不用是吗？老板坚持用Isotype, 可是找一个很匹配的Isotype真的好难？

作者: niwanmao 时间: 2019-5-16 18:40

小外星人发表于 2019-5-16 03:18
如果是胞内的细胞因子呢？也不用是吗？老板坚持用Isotype, 可是找一个很匹配的Isotype真的好难？
...

坚持用的话，一般厂家网站上，会在产品列表页有同型对照推荐的

作者: 小外星人 时间: 2019-5-17 03:49

niwanmao 发表于 2019-5-16 18:40
坚持用的话，一般厂家网站上，会在产品列表页有同型对照推荐的

是的，按那个选的，不好用

作者: niwanmao 时间: 2019-5-18 00:16

小外星人发表于 2019-5-17 03:49
是的，按那个选的，不好用

那只能用Fc Block代替了。

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