求MOUSE外周血溶血方法

niwanmao

你用的是站内这个配方的氯化铵裂解液吗？http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=178


如果确实不行，试试这个配方看：
RBC lysis buffer (388 mM NH4Cl, 29.7 mM NaHCO3, 25 µM Na2EDTA)

20.75 g. NH4Cl 2.5 g. NaHCO3 0.093 g. Na2EDTA 1 L. H2O

转自：fred hutchinson cancer research center http://labs.fhcrc.org/fero/Protocols/MouseCBC.html

niwanmao

luqhcolalove 发表于 2012-5-14 10:09

                               
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先谢二位帮忙，本人用的是BD进口Lyse溶血素，不过效果不好，有很多碎片，Mouse外周血白细胞物理参数图跟人 ...

BD的裂解液我用在人外周血和骨髓上面效果也不好。
还是勤劳一点，自己配吧，呵呵。

小鼠的外周血，我印象中似乎帮研究生测过，分布差不多，电压应该要稍微比人的要调大一点。

niwanmao

norman204 发表于 2012-7-2 07:21

                               
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记得深圳达科为有专门的小鼠红细胞裂解液。

成份是否了解？是否跟上面samly0提供的配方差不多？

niwanmao

laikete 发表于 2012-10-25 14:01

                               
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外周血我们实验室用的最简单的水裂解，效果一直都还可以

不会吧？从原理上说水属于低渗裂解，但似乎没看到过哪篇文章用过这方法吧

niwanmao

laikete 发表于 2012-10-26 11:00

                               
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我们都是用这种方法，裂解效果非常好，淋巴细胞，单核细胞，粒细胞分的特别清楚，主要是我们免疫学小鼠方 ...

是直接用蒸馏水处理10－15分钟吗？多少量？

niwanmao

laikete 发表于 2012-10-26 14:34

                               
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我们一般是这样：
外周血肝素抗凝100-200ul置冰上，另预先准备好9ml预冷的蒸馏水（15ml管中）
将血加入到 ...

这种做法让我想起染色体标本处理之前的计数，一般用2—4%的冰醋酸裂解红细胞，获得较纯的白细胞进行计数。
也有用冰醋酸和甲醇1:3混合。