Fc blocker的使用

niwanmao

如果你的抗体存在较明显的Fc片段非特异性结合，或者同型对照比空白管要高很多时，才要求使用。否则，可以用，也可以不用。

niwanmao

bullfoo 发表于 2015-12-3 22:17
谢谢倪老师的回复，“同型对照比空白管要高很多”这个我明白，“抗体存在较明显的Fc片段非特异性结合”这 ...

主要还是看图形。可以这么说吧，如果你能够确定标本细胞状态很好，肯定阴性，但是图形上很明显的非特异性荧光，这个时候需要考虑会不会是Fc片段原因。

niwanmao

zhang65103 发表于 2015-12-5 16:42
老师 ，在染色前加1%BSA作用和FC blocker一样么

类似，相对来说Fc Blocker更特异，效果可能更好。

niwanmao

mcdfish 发表于 2016-4-6 13:21
老板说可以加同种来源的血清进行封闭，比如鼠抗牛的inf-γ，就要用鼠的血清封闭，是这样吗？用的话要多少 ...

是的，用同种血清可以，我个人觉得一般50ul～100ul就够了。

niwanmao

mcdfish 发表于 2016-4-23 12:42
一管100ul的细胞加50-100ul？是不是多了点，您有个帖子上面说加1%，我加了1ul鼠的血清，感觉没什么效果。 ...

不会多。如果觉得不理想，也可以用商品化的Fc Blocker。