JC-1检测线粒体膜电位

niwanmao

EMF和BMP建议用看图软件转换为JPG格式上传。

具体的最好是直接圈出凋亡细胞，而不是计算比值，计算比值更多见于以前的免疫荧光时代，现在流式中虽然还是有人在用，但我个人觉得不太好，详细参见：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5352-1-1.html

niwanmao

shuang2014114 发表于 2016-8-30 20:38
非常感谢老师的指点，如果不计算比值，线粒体膜电位的下降就只能从图上大概的表示一下？还有，用画十字象 ...

你第一个CPT处理的那管，把十字门往上移到分界清晰处，其它两管十字门没有问题。
直接读取右下象限的数值，就是线粒体膜电位发生降低的早早期凋亡细胞比例。

我前面说了，用红、绿荧光相除，那是以前的老方法，尽管还有少量文章在用，但不太合理。

niwanmao

海棠依旧 发表于 2018-5-20 22:35
那请问老师现在应该用什么样的比值来表示线粒体膜电位

就用前面几个图的LR象限比例

niwanmao

海棠依旧 发表于 2018-7-6 09:33
是用LR/UR吗？不是红绿荧光比值吗？我理解的使用UR的红光/绿光或者是所有细胞的FL2/FL1 我也不知道对不对 ...

我个人不建议用比值，比值的方式虽然有文章采用，但这是非常粗的比较方法。

niwanmao

海棠依旧 发表于 2018-7-7 17:46
那老师是建议用细胞比例？UR/LR的比值对吗

我个人会直接用LR的比例，就是发生线粒体膜电位降低的那堆细胞比例。

niwanmao

aha 发表于 2018-9-20 12:07
意思就是12.jpg数值是37.2%，17.jpg右下数值是68.1.说明线粒体膜电位在升高？这样理解么？ ...

不是升高，而是膜电位降低。

niwanmao

aha 发表于 2018-9-20 19:08
那请问一下，为什么UR部分的有红光，又有绿光呢？  还有阳性对照是应该在LR部分么？ ...

昨天仓促，今天纠正了下。LR反映的是线粒体膜电位降低，就是凋亡早期事件。
UR部分不是叫又红光又绿光，而是膜电位完整的状态。做流式，切忌用红光绿光之类的来解读结果，而是应该注重其原理。

niwanmao

aha 发表于 2018-9-25 17:49
按照试剂盒原理的话，电势高的情况下，JC-1形成聚合物，呈现红色；电势降低的情况下，JC-1聚集不了，呈 ...

原理没错，你说的图最典型的就应该如http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5352-1-1.html 这里的线粒体膜电位图。
楼主的图体现不出FL1的增高，是个缺陷，会跟仪器、处理、条件等都有关系，但FL2分群出来了，所以将LR作为线粒体膜电位降低，而UR就对应的就是 http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5352-1-1.html 中那群红色的正常细胞。

niwanmao

wwww 发表于 2022-9-25 16:55
那请问老师直接用LR的比例代表线粒体膜电位降低的细胞比例做统计图合适么？纵坐标直接是线粒体膜电位降低 ...

可以的。