请帮忙分析一下这两个通道能否同时染呢？

niwanmao

可以同时染。
488nm激发，670附近是PE-cy5或PerCP系列。
640nm激发，660附近是APC和AF647系列。

因为他们的光路不在一起，所以最后分解出来的光是通过不同滤光片检测的，可以同时检测。

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-12 22:02
我想再咨询一下各位老师，我这里有一个仪器的配置 ：
488nm（530/30   572/28   615/20   675/30   780/6 ...

设置了7个通道，肯定都是可以同时测7色，只是补偿大小而已。就像ECD和PE、PC5之间虽然补偿大，但还是可以做的。

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-12 22:07
不好意思，老师我还想问一下如果某一荧光素分子都能被488和640nm的激光激发，那么他们的光路是不是相同的 ...

首先，我觉得这类荧光素存在的可能性小，其次即使能被两个波长的激光同时激发，也有主次之分。

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-14 22:44
那有不有两个荧光素之间，补偿太大，基本上发射光谱都是一样的，无法调补偿的情况。请举例说说，我下次好 ...

如果两个荧光素，激发光和发射光谱都相似，那就在同一个通道检测了。
很多啊，例如FITC和Alexa Fluor 488、APC和Alexa Fluor 647等等。

niwanmao

lgfffancy 发表于 2017-9-20 20:58
那就是FITC和Alexa Fluor488是不能同时染的，对吧，因为他们用都是488nm激发，然后检测通道也一样。 ...

是的。

niwanmao

slqian 发表于 2017-9-25 11:59
不知道PE-CY5能被640直接激发CY5吗？如果能直接激发，那么640就直接激发CY5和APC，由于这两个染料发射波长 ...

除非分解掉，否则不会。