CTL Teff 肿瘤免疫流式分析

niwanmao

1、目前看来，FoxP3效果反馈最好的还是Thermo的foxP3抗体和破膜剂。
2、可以先固定，如果要固定较长时间，建议用1～2％低浓度的。染色时先染表面标记，再进行破膜测核内foxP3，分析步骤可参照：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-6041-1-1.html

niwanmao

默背你的心碎 发表于 2018-12-12 10:38
赶着预试了一下，测的是小鼠的 脾脏，没有给药，所以默认它是正常的，还有B16F10 肿瘤（异位接种在小鼠上） ...

像是死细胞。
你如果往里面加一个死活染料（例如PI），将死细胞排除掉，就能看出问题所在了。

niwanmao

默背你的心碎 发表于 2018-12-13 16:55
倪老师，这个肯定是死细胞啊，我用4%多聚甲醛固定过的啊，还是您说是收集的时候细胞状态是死亡的。
这个肿 ...

固定后的细胞不叫死细胞，那是固定后PI染色假阳性的细胞。

从你这里的描述看，调节电压无效，那么考虑是一些碎片信号了。

niwanmao

默背你的心碎 发表于 2018-12-14 17:36
好的，好的，谢谢站长了，我再自己想想，再试试，争取弄出来，到时候把一些细节分享出来，共同进步 ...

每次出点结果，都可以再放上来讨论。慢慢可能就会有眉目。
你在解离组织的时候，是用酶消化还是机械法？

niwanmao

lilychen723 发表于 2019-12-16 08:52
老师您好，我想请教一下组织解离建议用机械法还是酶消化，比如像脾脏解离一般都是直接机械研磨，其他组织 ...

参考这本最完整的组织样本处理手册：http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-5834-1-1.html