求MOUSE外周血溶血方法

laikete

外周血我们实验室用的最简单的水裂解，效果一直都还可以

laikete

niwanmao 发表于 2012-10-25 19:58

                               
登录/注册后可看大图

不会吧？从原理上说水属于低渗裂解，但似乎没看到过哪篇文章用过这方法吧 ...

我们都是用这种方法，裂解效果非常好，淋巴细胞，单核细胞，粒细胞分的特别清楚，主要是我们免疫学小鼠方面的文章放外周血的图很少

laikete

niwanmao 发表于 2012-10-26 12:09

                               
登录/注册后可看大图

是直接用蒸馏水处理10－15分钟吗？多少量？

我们一般是这样：
外周血肝素抗凝100-200ul置冰上，另预先准备好9ml预冷的蒸馏水（15ml管中）
将血加入到9ml水中吹打约20-30sec（根据血量多少）
30sec后加入1ml 10*PBS终止反应
1700rpm 离心5min，倒掉上清，拿缓冲液（如PBSA）重悬沉淀即可分管染色上机