新手，急求帮忙分析细胞周期！！

didi_zhou

kansic 发表于 2014-7-25 13:23
你好，这是我做的操作步骤，因为我的细胞带mcherry的荧光，所以实验室师兄建议我用DAPI染色
1、将生长状态 ...

1. 不用多聚甲醛。
2. 直接用乙醇固定，纯水配，不要用PBS先重悬，析出的盐结晶会破坏细胞。
3. 固定后不用PBS洗，离心后直接染色。
4. 染色时间可以适当加长。
5. 操作要轻柔，减小吹打力度，最好用涡旋不要用枪头。

酒精固定以后细胞很脆弱，减少操作次数。

didi_zhou

Gallios做的，样本制备有问题，没有分析的必要，重新优化一下样本制备以及你的染色方法，你这个是单色分析，可以试试PI。

didi_zhou

niwanmao 发表于 2014-7-25 20:37
奇怪，DAPI在beckman机器上是FL9吗？  @didi_zhou

Gallios上面是9。B+R+V=5+3+2，10色。