斑马鱼眼睛细胞转染GFP的流式分析

didi_zhou

按照倪老大的说法就没问题了。FC500分辨4、5μm的颗粒基本是没有压力的。主要是FS/SS要用Log（所有的，只要用到FS、SS就用Log），电压也不用太大，先跑溶剂（就是重悬液），看看噪音，这个时候要注意阈值，因为用的是Log可能阈值要设在1~10之间，FC500上写的是Des.(descrimination)，默认是100，如果不改的话，就会像最后的Log图上，FS只剩最后一个Decade了。
建议是跑水的时候留一点点噪音的尾巴，号区分噪音与细胞。
最后FC500对小颗粒检测其实是有机关的（其实Beckman的机器基本上都有各种小颗粒检测机关），你打开盖子就可以看见，一般大角度FS适合检测小颗粒，小角度适合区分大颗粒（或死活），不知道你那台默认放在了哪里，如果分不出的时候可以调整一下。不过应该没有什么问题，0.5的与噪音都可以分开，除非悬浮液比较多大的杂质颗粒。
还有，画GFP阳性的时候最好用FITC/SS。
祝你实验成功。