找回密码
 加入流式中文网

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 27935|回复: 24

流式细胞术补偿调节9条准则

  [复制链接]
发表于 2014-8-7 11:08:57 | 显示全部楼层
origin of these rules (english edition)
Rules of compensation control samples.jpeg
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2014-8-8 11:09:05 | 显示全部楼层
本帖最后由 peansant 于 2014-8-8 11:21 编辑

“Rule 2”中,调补偿的对照样本必须含有阴性细胞群和阳性细胞群,以便比对median。
“Rule 9"中,补偿微球可以替代细胞。
版主另一个帖子”[图片]从一幅图看补偿是否调整到位“ http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-2890-1-1.html
      
     那么,若我有一类细胞,需要8种表面标记物加以鉴定,其中4种是阳性表达,4种是阴性表达(见附件1),问:
1.我培养出该细胞之后,应该如何调节补偿?4种阴性表达抗体的单染管中,荧光应该很难检测,阳性细胞群细胞数目估计很少,是否会影响补偿;
2. 若用补偿微珠替代4种阴性表达抗体的单染管,是否效果更佳?
3.该类细胞比较难培养,想尽量用补偿微球替代,选择补偿微珠时是否有讲究?之前用补偿微珠(见附件2)替代,那边操作仪器的老师说跟我细胞差异太大,不能调补偿,没搞懂啥意思。
4.若没有单染管的信息,只有8种抗体加在一管里的那个DATA和未加抗体的那管的DATA,可以分析补偿调节是否到位吗?结果见附件4。

附件1:抗体信息
mMSC Antibody panal:
CD44+ CD90.2+ CD105+ Sca-1+  
CD31-  CD34-  CD45-  CD11b-
  
品牌
  
货号
名称
规格
检测通道
Miltenyilbiotec
 
CD105-PE
 
FL2
Miltenyilbiotec
 
CD45-APC
 
FL6
BD Pharmingen
560452
Ms CD44 V450   0.025 mg IM7
25 ug
FL9
BD Pharmingen
562058
MS LY-6A/E FITC MAB 0.025MG D7
25 ug
FL1
Biolegend
102417
PE/Cy7 anti-mouse CD31 Antibody
25 ug
FL5
Biolegend
128607
PerCP/Cy5.5 anti-mouse CD34 Antibody
25 ug
FL4
BD Pharmingen
562317
MS CD11B PE-CF594 MAB 0.025MG M1/70
25 ug
FL3
Biolegend
105327
APC/Cy7 anti-mouse CD90.2 Antibody
25 ug
FL8
流式仪器:Gallios 10色 (附件3)

ultracomp ebeads.pdf

597.56 KB, 下载次数: 6

附件2

Gallios.pdf

1.58 MB, 下载次数: 5

附件3

origin data.rar

2.11 MB, 下载次数: 1

附件4

流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
您需要登录后才可以回帖 登录 | 加入流式中文网

本版积分规则 需要先绑定手机号

手机版|流式中文网 ( 浙ICP备17054466号-2 )

浙公网安备 33038202004217号

GMT+8, 2025-5-25 12:53

Powered by Discuz! X3.5

© 2001-2025 Discuz! Team.

快速回复 返回顶部 返回列表