请问用全血和PBMC标Treg在标Foxp3时步骤有什么区别吗？

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倪老师，用人全血分离淋巴细胞做Treg，用血量大概多少呢？孵抗体前要求细胞悬液浓度是10*7/ml~

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http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... ypeid%26typeid%3D35
倪老师，是参考这个贴吗？ 全血之后进行红细胞裂解？我们是要做Treg的、我所看的文献用血量都好多啊（先进性淋巴细胞分离再表染破膜）

上述链接的贴竟然只用了200ul全血就能搞掂？感觉这样本量差了不止一点半点啊，不知是不是我理解错了~~

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100ul 全血就能收集到细胞悬液浓度是10*7/ml？表示不可思议啊~倪老师，请问有相应的protocal吗？想参照一下呢~~

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嗯呢，谢谢倪老师！！！

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倪老师，你看看我的设计对不对：取100ul抗凝全血先做表面标记（如我做的Treg，就先将CD3、CD4、CD25一起孵育），然后进行红细胞裂解，最后染Foxp3。
实验设计：
空白管：即仅仅是用100ul抗凝全血做红细胞裂解所得白细胞悬液；
表面标记管：100ul抗凝全血与表面标记抗体一同孵育（CD3、CD4、CD25），然后红细胞裂解制备成悬液
破膜管：即在表面标记管基础上进行后续破膜、孵Foxp3抗体

此处不知是否有必要增加Foxp3同型对照管??