APC标记的IL-10位置出现不对

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本人使用的是BD的C6流式细胞仪，4通道设置，免调电压，最近使用APC标记的IL-10，占用的是4通道，不管是单染管还是全染管，IL-10感觉一直出现在双阳的位置，调补偿也调不回去，不知是怎么回事，谁能帮忙解答一下，下面是一张单染管的图

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niwanmao 发表于 2018-7-16 10:48
其它通道用了什么抗体？

老师，我1通道使用的是FITC标记的TCR，2通道使用的PE标记的CD1d四聚体，3通道使用的是Percp-cy5.5标记的T-bet

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这个问题是不是很难解决呀

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niwanmao 发表于 2018-7-24 09:07
你看样就T-bet和CD1d等单染管是不是也存在这一群？如果也存在这群，那么就说明这群是非特异性信号。如果 ...

我做其它单染管，基本上没有那一团，应该是特异性染色，就是不知道该怎么解释

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niwanmao 发表于 2018-7-24 22:08
证明是特异性，那么就说明这类淋巴细胞表达胞内IL-10。

这团细胞是表达IL-10，但应该只表达IL-10，应该出现在左上角的位置，但现在貌似出现在双阳的位置，这就无法解释了

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niwanmao 发表于 2018-7-27 21:52
T细胞不能是T-bet＋IL-10＋？

老师，我们分析的是NKT10，前面先把NKT圈出来，然后再设门，目前还没见文献报道有T-bet＋IL-10＋的NKT细胞，只有T-bet＋NKT和IL-10＋的NKT

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niwanmao 发表于 2018-7-29 13:05
其它图我都没看到，不知道你前面的设门如何。无论评价。

老师，我是这样做的，见下面流式图

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niwanmao 发表于 2018-7-29 16:40
这几个图放出来就明显看出是死细胞的非特异性染色。不是特异性的。所以你之前认为特异性的判断是错误的。 ...

好的，谢谢老师

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niwanmao 发表于 2018-7-29 16:40
这几个图放出来就明显看出是死细胞的非特异性染色。不是特异性的。所以你之前认为特异性的判断是错误的。 ...

倪老师，我还想问一个问题，细胞透化固定以后不是都已经死了吗，还需要区分死活吗？

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niwanmao 发表于 2018-7-29 20:35
有针对需固定破膜的商品化死活染料。在破膜前染。

倪老师，这个死活染料也是要占用一个通道的吧，但目前我们的C6四通道已被检测指标给占用完了，有没有其他的办法可以减少这种非特异性染色呀。