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[结构和原理] 请问一下怎么确定细胞的获取量?

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发表于 2024-5-24 13:19:23 | 显示全部楼层
目标细胞群占父群比例高于5%时,收集父群10000-20000个细胞,目标细胞群的批内和批间精密度需满足CV<25%的接受标准;目标群占父群比例<5%时,根据情况收集目标细胞群500-2000个,目标细胞群的批内和批间精密度满足CV<35%的接受标准。CV=(SD/Mean)*100%
有多个目标细胞群时,以占比最少的目标细胞群来确定收集细胞数目。
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发表于 2024-5-27 08:51:12 | 显示全部楼层
这个是没有公式可以套用的;
如果CV不满足要求,可能是抗体、人员操作和仪器稳定性等各方面共同作用的结果,需要结合使用同一抗体的其他实验、换实验员操作、仪器质控、同一台仪器开展的其他实验等进行逐一排查。
CV与仪器的性能是有关系的,但仪器性能不是影响CV的唯一因素,甚至不是关键因素,人员操作和抗体等关键试剂才是。
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发表于 2024-5-28 09:14:18 | 显示全部楼层
获取的细胞量真的没有标准的。需要实验员自行决定。如果细胞数目少,收集3000个,5000个也是可以的。如果细胞数目多,收集10000个、15000个、20000个甚至30000个也可以。常规基础实验。如凋亡、活性氧、膜电位等,一般收集单细胞5000个、10000个或者15000个;细胞周期一般收集15000-30000个;表型分析的话,就按照我之前说的标准收集。
理论上,增加收集的细胞数确实可以减少偶然误差。但是流式细胞仪、抗体试剂、检测方法这些结合在一起是有检测限的。一般来说目标细胞群已经收集到了2000个,CV还不满足要求,只能说明这个样品超出了目前所使用的流式细胞仪、抗体试剂、检测方法的检测限。
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