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发表于 2020-10-11 13:53:38
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老师，您说的激发光效率是什么意思？ 我用的是普通的荧光显微镜，细胞HK-2，染料是bodipy C11（10uM） 和 hoechst 33342 同时染得，，37°孵育30分钟，PBS洗3次
在镜下看DAPI 会有两种颜色，并且颜色随时间在变化，变化速度很快，
另外 在GFP通道看绿光 荧光也是逐渐变亮的，时间大概10s左右 我录了视频，详见附件里
但是在红色通道里看到的荧光是逐渐减弱的，减弱速度也比较快。
因为荧光变化太快所以也没法拍照定量了。
同时C11染料染同样的细胞做了一次流式，通道选择FITC 488/525 和 PE 561/585，
如图 红色峰bank组；蓝色峰是NC组，发现相对于blank组，染色组的PE荧光增加很明显，而FITC通道仅仅增强了一点点，并且我的处理组和对照组没有差异（阳性对照也没有差异），我考虑会不会因为FICT的激发时间很长，导致光还没有亮起来流式仪已经检测过了？ 如果是这种情况下该如何用流式检测这种染料呢？搜遍了文献也没有看到解决办法。
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