免疫治疗（如抗CTLA-4、PD-1、LAG-3抗体）通过激活受免疫检查点抑制的T细胞发挥作用，但部分患者仍无响应。临床前研究依赖同源小鼠肿瘤模型（如MC-38）评估药物疗效，流式细胞术是核心工具。DeNiro G等人介绍了一种30色全光谱流式细胞术组合（OMIP-105），用于在小鼠同源MC-38结肠癌模型中全面分析脾脏和肿瘤的免疫细胞详细组成。该组合可检测CD4 T细胞、CD8 T细胞、调节性T细胞、NK细胞、B细胞、巨噬细胞、粒细胞、单核细胞和树突状细胞等亚群的频率及功能状态，尤其适用于免疫细胞浸润极少的“冷肿瘤”模型，并可用于评估治疗对免疫微环境的影响。  

• 用途：小鼠C57BL/6免疫细胞高维度分析，涵盖T、B、NK、中性粒细胞、单核细胞、树突状细胞、巨噬细胞亚群
  

- 物种：小鼠C57BL/6
- 细胞类型：脾脏单细胞悬液（机械处理）或肿瘤单细胞悬液（机械与酶处理）

抗体组成



设门
30色组合在同源MC-38肿瘤模型中的分析示例：  
1、设门策略：  
- 初始设门选择CD45+活细胞，排除粘连体。  
- 通过CD11b与NK-1.1表达区分髓系细胞、NK细胞及CD11b⁻/NK-1.1⁻细胞。  
2、髓系细胞细分：  
- 中性粒细胞（CD11b⁺ F4/80⁻ MHC-II⁻ Ly6G⁺ Ly6Cmed）
- 单核细胞（CD11b⁺ F4/80⁻ MHC-II⁻ Ly6G⁻ Ly6Chi）
- 肿瘤相关巨噬细胞（TAM，CD11b⁺ F4/80⁺）
- CD11b⁺经典树突状细胞（CD11b⁺ cDCs，CD11c⁺ MHC-II⁺）。  
3、NK细胞分析：  
- 通过Ly6C、Granzyme B、LAG-3、NKG2D进一步分群。   
4、T细胞亚群分析：  
- TCR-beta⁺为α/β T细胞（主要群体），TCR-beta⁻为γ/δ T细胞。  
- CD4⁺/CD8⁺分群后，调节性T细胞通过CD25⁺/FoxP3⁺双阳性鉴定。  
- 分化与功能标记：  

• 初始（CD44⁻ CD62L⁺）、中央记忆（CD44⁺ CD62L⁺）、效应记忆（CD44⁺ CD62L⁻）T细胞。  
• 耗竭标记：PD-1、CTLA-4、LAG-3、Tim-3。  
  

5、B细胞与树突状细胞：  
- B细胞（CD19⁺ MHC-II⁺）
- 浆细胞样树突状细胞（pDCs，CD11c⁺ PDCA-1⁺ CD45R/B220⁺）。  
6、髓系细胞功能标记：  
- PD-1、CD80、Tim-3、Ki-67表达分析，评估免疫抑制或促炎状态。  



关键点  
1. 组合优势：首个针对小鼠同源肿瘤模型开发的30色全光谱流式组合，兼容酶解离组织（胶原酶IV + DNase 1）。  
2. 应用范围：已成功用于MC-38、KPC、B16F10等模型，可拓展至非肿瘤研究。   
3. 生物学意义：  

• CD103⁺CD8⁺ T细胞浸润预测免疫治疗响应。  
• PD-1⁺CD8⁺ T细胞中Ki-67⁺比例与临床预后相关。  
• Tim-3⁺树突状细胞通过多机制调控抗肿瘤免疫。
  

文献源：DeNiro G, Que K, Fujimoto T, et al. OMIP-105: A 30-color full-spectrum flow cytometry panel to characterize the immune cell landscape in spleen and tumor within a syngeneic MC-38 murine colon carcinoma model. Cytometry A. 2024;105(9):659-665. doi:10.1002/cyto.a.24886IF: 3.7 Q2