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全球每年有数百万患者等待器官移植,但捐赠器官数量严重不足。基因编辑猪(如Gal-KO猪)的出现为异种移植带来曙光,但超急性排斥后的慢性排斥仍是主要障碍。
哥伦比亚大学研究团队在《Cytometry A》发表了22色流式细胞术方案,实现了在猪-狒狒操作耐受模型中,同步追踪嵌合体形成、免疫重建和胸腺新迁出细胞(RTE) 的动态过程,解决了跨物种检测的技术瓶颈 :
- 抗体交叉反应:抗人抗体与狒狒/猪抗原结合特性不明
- 猪抗体稀缺:仅4种荧光素预制抗体(FITC/PE/Biotin/AF647)
- 验证难题:如抗狒狒CD16(3G8克隆)虽结合NK细胞,但与粒细胞完全不反应,且不与CD56共标
▶ 样本类型
- 外周全血、PBMC、骨髓、胸腺、肾脏单细胞悬液
▶ 关键目标与标记物选择
▶ 抗体组合关键优化
pMHC-I抗体(74-11-10)需自行用EZ Link NHS PEG试剂盒(Thermo Cat# PI21455)偶联生物素,再通过二抗放大信号
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