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标题:流式细胞仪检测细胞内ROS表达水平 1、取对数生长期的细胞,均以4×10E5/ml的密度接种于6孔培养板上; 2、培养过夜后,用相应药物处理细胞; 3、消化收集细胞(悬浮细胞不需要消化),要注意掌握消化时间,避免细胞碎片产生过多; 4、PBS缓冲液清洗一次,随后重悬细胞于1ml的PBS缓冲液中; 5、加荧光探针CM-H2DCFDA至终浓度10 uM ,37℃孵育30分钟,上流式细胞仪分析活细胞内ROS的积聚情况。 |