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[结构和原理] 细胞直径(微米)和流式象限中显示的细胞大小有联系么?

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发表于 2016-10-4 11:03:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
想要知道某一群细胞是什么细胞(用流式标记各种抗体初步筛选)
HE染色得知这种细胞约40-50微米,且比例占10-13%,涂片中有其他类型细胞,主要是中性粒细胞(25微米),流式检测没有分群
我的问题是:能否在流式检测中根据HE染色细胞大小来寻找这一部分细胞?
  标本是小鼠腹腔灌洗液

谢谢!


















最佳答案

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不能,流式上面,一定大小范围内,FSC是和大小相关,但不是呈正比,而且大小区分肯定不纯粹。 我的建议是,你用粒细胞特异性标记(例如CD66c等)排除掉粒细胞之后,再在FSC/SSC图上看你要找的这类细胞表达情况。
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发表于 2016-10-4 11:03:36 | 显示全部楼层
不能,流式上面,一定大小范围内,FSC是和大小相关,但不是呈正比,而且大小区分肯定不纯粹。
我的建议是,你用粒细胞特异性标记(例如CD66c等)排除掉粒细胞之后,再在FSC/SSC图上看你要找的这类细胞表达情况。
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 楼主| 发表于 2016-10-9 21:01:19 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-10-4 11:43
不能,流式上面,一定大小范围内,FSC是和大小相关,但不是呈正比,而且大小区分肯定不纯粹。
我的建议是, ...

为什么要排除粒细胞呢,这部分细胞也可能是粒细胞范畴呢
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发表于 2016-10-10 08:46:52 | 显示全部楼层
yamapisama2012 发表于 2016-10-9 21:01
为什么要排除粒细胞呢,这部分细胞也可能是粒细胞范畴呢

你前面不是说“涂片中有其他类型细胞,主要是中性粒细胞”,这意思难道不是说这类细胞不是粒细胞吗?
关键是你得说清楚你究竟要分出什么细胞,根据这类细胞的抗原表达特点圈出来不就行了,为什么一定要纠结于大小选择?大小绝对选不好的,FSC的影响因素很多。
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 楼主| 发表于 2016-10-12 16:15:06 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-10-10 08:46
你前面不是说“涂片中有其他类型细胞,主要是中性粒细胞”,这意思难道不是说这类细胞不是粒细胞吗?
关 ...

不知道是什么细胞,也可能是粒细胞也可能不是。主要想知道来源于哪种细胞。
用了多种抗体标记全腹腔灌洗液细胞,正在分析,谢谢站长的细心回答!有进展会跟进!谢谢!
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发表于 2016-10-12 18:53:10 | 显示全部楼层
yamapisama2012 发表于 2016-10-12 16:15
不知道是什么细胞,也可能是粒细胞也可能不是。主要想知道来源于哪种细胞。
用了多种抗体标记全腹腔灌洗 ...

如果不知道细胞来源,更加不能用大小来衡量了。但体液里面大多数应该是巨噬细胞,其它有粒细胞、淋巴细胞、组织细胞,如果不确定,可以先初步用染色的方法看看形态学像什么,然后再去做相关标记。
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 楼主| 发表于 2016-10-12 23:51:08 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-10-12 18:53
如果不知道细胞来源,更加不能用大小来衡量了。但体液里面大多数应该是巨噬细胞,其它有粒细胞、淋巴细胞 ...

HE染色做了的,倪老师对细胞形态了解么?可以私信给你发细胞照片帮我看一下么?
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发表于 2016-10-13 08:49:16 | 显示全部楼层
yamapisama2012 发表于 2016-10-12 23:51
HE染色做了的,倪老师对细胞形态了解么?可以私信给你发细胞照片帮我看一下么? ...

我不太懂,你可以发上来,站内有些形态学高手。
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 楼主| 发表于 2016-10-16 23:46:07 | 显示全部楼层
本帖最后由 yamapisama2012 于 2016-10-16 23:49 编辑

请各位形态学高手指教!(HE染色)



HE染色

HE染色
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 楼主| 发表于 2016-10-16 23:50:46 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-10-13 08:49
我不太懂,你可以发上来,站内有些形态学高手。

不知道这个像素可不可以,截图裁剪就这样了,还需要更高像素的话我再重新发
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