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发表于 2018-5-6 23:32:36
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Calcium Flux 检测(使用Fluo-3-AM)
*Fluo-3-AM会沉淀,25℃水域溶解片刻再使用
1.cell 使用 HBSS(Hanks' Balanced Salt Solution)洗3次, HBSS重悬,计数至1x107/ml
2.加Fluo-3-AM至5uM(1000倍稀释), 37℃ 孵育1hr, 中间混匀细胞几次
3.HBSS洗3次
4.重悬细胞 in HBSS(含Ca2+和Mg2+)+10mM HEPES(pH=7.5)+1mg/ml BSA, 计数至1x106/ml
5.将细胞按1ml/管分至流式管
6.不处理细胞,先上机收集信号20s,马上加入蛋白,继续收集信号5min |
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