流式T细胞配色

majiaxin

各位老师，最近在购买流式抗体，他们推荐了一下配色，想请各位老师帮忙看看

小鼠	TREG	TH17	TH1	TH2		人	TREG	TH17	TH1	TH2
V500	CD4	CD4	CD4	CD4		V500	CD4	CD4	CD4	CD4
PE	CD25					PE	FOXP3
BV421	FOXP3	IL17				BV421		IL17
FITC			IFNγ			FITC			IFNγ
APC		RORγt		IL4		APC	CD25	RORγt		IL4

wxd

单看这个配色的话，这四种细胞是不能同时检测的，需要分成三管才行。人的样本一般数量都有限，能一管检测完毕，就不要分开检测。另外看配色方案里有BV421、FITC和APC，我猜你要用的流式细胞仪是有405 nm、488 nm和633 nm（也可能是647 nm）激光器的，而有三个激光器的流式不太可能只有五个通道。所以要么是你只提供了五个通道给试剂供应商让他们配色。要么这个试剂供应商代理的流式抗体公司只有一家，并且这家只有这几种配色。建议你先搞清楚你要用的流式细胞仪的通道，把荧光通道信息发给供应商让他们配色。另外多咨询一些大品牌比如BD、eBioscience等大公司产品的代理商，大公司的抗体配色更全面一些。

niwanmao

分4管测，应该是可以的，不过再搭配CD3还是有必要的。

majiaxin

wxd 发表于 2022-12-5 18:19
单看这个配色的话，这四种细胞是不能同时检测的，需要分成三管才行。人的样本一般数量都有限，能一管检测完 ...

奥奥，好的谢谢您，我再去问问他们

majiaxin

niwanmao 发表于 2022-12-5 20:48
分4管测，应该是可以的，不过再搭配CD3还是有必要的。

老师，请问搭配CD3是有什么作用吗

tiger

majiaxin 发表于 2022-12-6 10:23
老师，请问搭配CD3是有什么作用吗

加CD3是排除单核细胞，特别是人血。

majiaxin

tiger 发表于 2022-12-6 15:35
加CD3是排除单核细胞，特别是人血。

奥奥，好的谢谢老师