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[凋亡检测] 线粒体膜电位JC-1

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发表于 2023-10-31 11:10:09 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
大家好,我是流式小白,这是我的第一个流式实验。结果分群特别差,我看了很多站内很多JC-1相关的帖子,补偿也调试过分不开(可能是我不会调)。
实验目的:测线粒体膜电位,买的碧云天的JC-1试剂盒,按照说明书操作。
请求老师们解惑:
1、结果不好的原因,是不是FSC和SSC电压没调好,PE和FITC是因为补偿没调好吗?
2.  我的测试是不是失败了?
空白组:

                               
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流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2023-10-31 11:11:35 | 显示全部楼层
本帖最后由 13450328474 于 2023-10-31 11:17 编辑

图片被吃了?我重新发一下
CCCP阳性组.png
空白组.png
阴性组.png
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2023-10-31 11:43:24 | 显示全部楼层
FSC和SSC条件需要调节,而且细胞状态确实不太好~
20231031-Layout-2.png
20231031-Layout-Batch.png
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
 楼主| 发表于 2023-10-31 12:02:42 | 显示全部楼层
范晋波 发表于 2023-10-31 11:43
FSC和SSC条件需要调节,而且细胞状态确实不太好~

感谢老师回复!是细胞本身线粒体膜电位就很低的缘故吗?然后我分群这么差劲的原因还有可能是因为啥?
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2023-10-31 12:12:39 | 显示全部楼层
13450328474 发表于 2023-10-31 12:02
感谢老师回复!是细胞本身线粒体膜电位就很低的缘故吗?然后我分群这么差劲的原因还有可能是因为啥? ...

应该就是细胞质量的问题,做个正常组的,排除一下实验处理造成的影响~
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2023-10-31 12:13:10 | 显示全部楼层
13450328474 发表于 2023-10-31 12:02
感谢老师回复!是细胞本身线粒体膜电位就很低的缘故吗?然后我分群这么差劲的原因还有可能是因为啥? ...

阈值也可以小一点,有些细胞都被切掉了
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2023-10-31 13:19:24 | 显示全部楼层
范晋波 发表于 2023-10-31 12:13
阈值也可以小一点,有些细胞都被切掉了

好的,谢谢老师
流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
 楼主| 发表于 2023-10-31 13:28:28 | 显示全部楼层
范晋波 发表于 2023-10-31 12:13
阈值也可以小一点,有些细胞都被切掉了

样本是新鲜的,有没有可能是试剂的问题或者实验操作的问题。试剂是在4℃误放保存了半年的JC-1,说明书说-20℃保存
组织样本处理不好?流式中文网原研的魔滤®魔杵®套装,低成本解决,高质量收获
发表于 2023-11-7 17:20:44 | 显示全部楼层
13450328474 发表于 2023-10-31 13:28
样本是新鲜的,有没有可能是试剂的问题或者实验操作的问题。试剂是在4℃误放保存了半年的JC-1,说明书说- ...

有这个可能,如果探针失效,这种图像也可以解释
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