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发表于 2024-3-5 08:18:47
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看了下说明书,似乎跟你这里有所不同,你是否对照着再重复看看?
对于悬浮细胞:
a.取10-60万细胞,重悬于0.5ml细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
b.加入0.5ml JC-1染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
c.在孵育期间,按照每1ml JC-1染色缓冲液(5X)加入4ml蒸馏水的比例,配制适量的JC-1染色缓冲液(1X),并放置于冰浴。
d.37℃孵育结束后,600g 4℃离心3-4分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
e.用JC-1染色缓冲液(1X)洗涤2次:加入1ml JC-1染色缓冲液(1X)重悬细胞,600g 4℃离心3-4分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入1ml JC-1染色缓冲液(1X)重悬细胞,600g 4℃离心3-4分钟,沉淀细胞,弃上清。
f.再用适量JC-1染色缓冲液(1X)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
PS:发帖请选择提问版块,此次先帮你转移过去:
1、基础问题(如仪器、原理、试剂耗材、软件等)
2、临床检测方面(如免疫分型、淋巴细胞亚群等)
3、科研方面(如周期、凋亡、线粒体、DC、巨噬等)
4、流式分选和磁珠分选
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